目录
摘要1
关键词1
Abstract2
Keywords2
前言3
1材料与方法8
1.1试剂与仪器8
1.1.1试剂与材料8
1.1.2主要仪器9
1.2 试验方法9
1.2.1量子点荧光微球免疫层析试纸条的制备9
1.2.1.1量子点荧光微球探针的制备9
1.2.1.2免疫层析试纸条的组装与检测结果读取9
1.2.2量子点荧光微球免疫层析试纸条灵敏度检测11
1.2.2.1标准曲线的绘制11
1.2.2.2最低检测限的分析与确定11
1.2.3量子点荧光微球免疫层析试纸条检测法回收率测定11
1.2.4量子点荧光微球免疫层析试纸条稳定性的检测11
1.2.5实际样品的检测12
1.2.6所建立方法与现存检测方法的比较12
2结果与分析12
2.1量子点荧光微球的透射电镜图12
2.2溶液pH对于量子点荧光微球荧光性能的影响12
2.3荧光微球免疫层析试纸条灵敏度的确定13
2.3.1标准曲线13
2.3.2检测限的确定14
2.4回收率测定14
2.5与其他检测方法的对比14
2.6实际样品的检测结果15
3讨论15
3.1氯霉素完全抗原制备过程的要点15
3.2免疫荧光微球探针的制备条件优化16
3.3试纸条制备中硝酸纤维素（NC）膜的优化16
3.4免疫荧光层析试纸条检测法的应用及展望17
致谢17
参考文献18
氯霉素类抗生素残留快速检测方法的建立及应用
摘要
在人们对于动物性食品的需求量不断增加的情况下，食品里面残存的兽药对人类健康的威胁逐渐变成了如今十分凸显的食品安全方面的问题。残存的兽药不仅会给人体带来急慢性中毒的情况，使机体对于细菌的耐药性提升，还会经由食物链与环境的关系为人类健康带来潜在威胁。 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
氯霉素类抗生素残留引起的食品安全问题已引起人们的普遍关注，由于其抑菌谱广,效果好以及相对廉价,在我国用氯霉素治疗家畜、禽类疾病也比较普遍，在科学技术飞速发展，分析检测的能力持续进步的情况下，在检测氯霉素类抗生素方面的新技术也不断丰富，它们之中快速检测的手段受到了研究人员们的关注，其主要优势为经济便利、成本低，对于大批量样本的快速检测十分适用，在临床诊断、环境保护及氯霉素类药品成分残留分析等方面应用前景十分广泛。由于在应用过程中多偏向于现场即时检测，因此迫切需要建立快速、灵敏、准确的残留监控、检测方法。本文就氯霉素类抗生素残留的快速检测方法中免疫荧光试纸条快速检测法进行展开论述。
引言
氯霉素类抗生素(Chloramphenicols,CAPs),是一类包括氯霉素(Chloramphenicol,CAP)及氯霉素衍生物的广谱高效抗菌性药物[1]。1947年,被首次从委内瑞拉链霉菌(Streptomycesvenezuela)中分离得到[2]。1948年,工作人员确定其结构并使之成为第一种完全由人工合成的抗生素。目前常见的药用氯霉素类抗生素有氯霉素、甲砜霉素(Thiamphenicol)等。该类抗生素抑制病原菌的原理主要是通过转换抗生素自身和改变微生物代谢机制,广泛用于治疗动物各种细菌性传染疾病,对各类家禽、家畜、水产品及蜂蜜制品各种传染性疾病的控制和治疗起重要作用[3]。医学研究表明,肉、蛋和奶等动物源性食品中的CAPs残留对人体有严重的副作用,长期微量摄入会使一些致病菌产生耐药性,并且引起机体正常菌群失调，使人们容易感染各种疾病。此外,CAPs对人的骨髓细胞、肝细胞具有毒性作用,尤其是会引起与计量和疗程无关的不可逆再生障碍性贫血。
因此,许多国家已出台了关于氯霉素类药物禁用的相关法律法规和政策。例如,欧美仅允许氯霉素用于非食用动物；我国农业部2002年发布《食品动物禁用的兽药及其他化合物清单》,规定禁止在所有动物源性食品中使用氯霉素。但由于CAPs价格低廉、抑菌效果好,目前仍被少数厂家违规使用,既对人类的健康造成极大威胁,也大大挫伤了人们对食品安全的信心。食品安全事件的频发和保障食品安全涉及到很多层面,但是无疑分析检测技术是保障食品安全的重要技术支撑,从监督层面对保证食品质量安全、保障人民身体健康等方面起到积极的促进作用[4]。
文献综述：
对于检测残留氯霉素类抗生素含量的手段主要包括免疫速测法、光谱分析、色谱检测及微生物检测等多种快速检测手段。目前应用最广泛的氯霉素类抗生素检测手段如下：
1.酶联免疫吸附法
此方法简称为(ELISA)，属于标记物为酶的免疫分析手段。ELISA包括多种检测方法，如竞争法、间接法及夹心法。这些方法中间接法及夹心法用来对大分子抗原及抗体进行检测，对于临床诊断较为适用；竞争法用来对小分子抗原进行检测，对于食品安全情况的分析较为适用。研究人员程冰通过竞争法对家禽可食用部位里面残留的氯霉素成分的分布情况进行了分析。郝俊虎等人通过ELISA法对鸡肉内的氯霉素含量进行检测，检测限达到了0.02ng/mL,收集到样本中氯霉素标准品的所有浓度的回收率均超过84.8%。Tajik等通过HPLC及ELISA等手段对鸡的鸡肉、肾脏及肝部等残留的氯霉素含量进行检测，根据结果显示，这两种方法得到的检查结果几乎是相同的。杨艳艳等给基于对ELISA方法的阻断与构建氯霉素单克隆抗体(CAPmAb)杂交瘤细胞株的方法，开发出了对于残留CAP含量进行快速检测的相关试剂盒，即CAPkit,同时检测了其具体的实用性能。另外，如今市场中也涌现了大量具有商品化特征的试剂盒[5],能够直接在生产过程中使用，对于大量的检测样本的氯霉素残留量的检测较为适用。

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