目录
摘要1
关键词1
Abstract2
Key words2
引言（或绪论）3
1材料与方法3
1.1文献综述 3
1.2方案论证 4
1.3试剂与耗材4
1.3.1试剂5
1.3.2实验动物及佐剂5
1.3.3主要实验仪器5
1.4实验方法5
1.4.1实验目的5
1.4.2实验步骤6
2结果与分析 11
2.1RTP4重组蛋白表达鉴定结果分析11
2.2RTP4重组蛋白纯化结果分析11
2.3RTP4抗体分析11
2.4抗体纯度鉴定13
3讨论与结论13
3.1讨论13
3.2结论14
致谢15
参考文献...16
小鼠RTP4蛋白抗体制备及验证
摘要
目的：RTP4蛋白是调控G蛋白偶联受体跨膜运输和发挥功能的重要辅助蛋白。本实验旨在制备小鼠RTP4蛋白抗体并体外验证RTP4蛋白抗体的反应活性和特异性。方法：首先将构建的小鼠RTP4基因原核表达质粒转化至大肠杆菌内诱导表达，并使用6xHis Ni柱纯化方法进行纯化。然后以表达纯化的RTP4蛋白作为抗原免疫兔子，制备RTP4兔多克隆抗体，并采用亲和层析纯化RTP4蛋白抗体。最后采用Western Bolt和ELISA试验方法对制备获得的抗体进行体外验证。结果：RTP4原核表达载体转化大肠杆菌，经IPTG诱导，成功表达了RTP4目的蛋白。通过Ni柱层析，获得高纯度的重组蛋白RTP4。该蛋白免疫兔子后，获得了与RTP4蛋白反应特异的抗RTP4抗体。抗原亲和层析后，获得高纯度的RTP4抗体，效价达到1：512000。使用RTP4蛋白抗体进行Western Bolt和ELISA试验验证后证明该抗体对小鼠RTP4产生特异的反应。结论：成功制备了高效价、高纯度的RTP4蛋白抗体，为深入研究临床试验可研究性及实用性提供了重要的实验基础。

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