目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法3
1.1试验材料 3
1.2种鸡蛋的分组与孵化管理3
1.3样品的采集4
1.4样品组织切片的制作及图片分析处理4
1.5基因的定量测定及分析5
2结果7
2.1睾酮对于鸡胚骨骼肌的影响7
2.2不同胚龄鸡胚骨骼肌中MRFs的表达水平分析 9
3讨论 11
3.1鸡胚骨骼肌的生长发育 11
3.2肌纤维的融合 12
4结论13
致谢14参考文献14
雄激素对鸡胚骨骼肌中生肌调节因子（MRFs）表达的影响
摘要
对于禽类，胚胎期是其骨骼肌纤维生长发育的重要时期，骨骼肌的肌纤维数目在胚胎期发育结束后就已确定，出生后数目不再改变。因此在胚胎期生成尽可能多数目的骨骼肌纤维可提升肉用家禽的生产性能。本实验意在研究雄激素对于鸡胚骨骼肌中生肌调节因子表达量的影响，利用雄激素处理试验组鸡胚和空白对照组鸡胚进行对比，观察肌肉中肌纤维的生长发育与融合情况。目前研究结果表明雄激素可以促进鸡胚的骨骼肌的发育，同时可以提高MRFs在鸡胚骨骼肌中的表达水平，因此证明了雄激素对于鸡胚骨骼肌生长发育的促进作用是通过活化MRFs的表达量产生的。
引言
引言：随着养殖业的不断发展以及集成化的养殖规模不断扩大，从改善养殖方式这一途径来增加畜产品产量的做法成效已经微乎其微。为了满足人民群众日益渐长的生活需求，如何提供大量优质的肉类已经成为了一个重要关注点。一方面相较于家畜的繁殖周期和生长周期，禽类产品的生产周期要短的多；另一方面，家禽的料肉比更低，在消耗等量饲料原料的情况下能产出更多的肉。因此探寻如何让家禽产出更多的肉类来填补市场空缺从而获取经济效益是一个十分有价值的研究课题。根据国内外已有的研究表明，对于禽类而言胚胎期是其骨骼肌纤维生长发育的重要时期[]。骨骼肌纤维是一种终末分化的细胞类型, 其数量和直径与动物的肉产量密切相关。纤维数量越多、纤维直径越适中, 则产肉量越多 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ￥351916072￥ 
、肉品质越好。骨骼肌纤维的生长发育需要成肌细胞的增殖和分化, 而骨骼肌组织中的成肌细胞以肌卫星细胞 (satellite cell, SC) 的形式存在, 当卫星细胞被激活, 经历多次有丝分裂增殖后分化融合到已有的肌纤维中或形成新的肌纤维, 最终形成肌肉。在骨骼肌纤维形成的过程中, 肌卫星细胞的激活、增殖与分化等复杂过程受多种因素的调控, 其中生肌调节因子(Myogenic regulatory factors, MRFs)是最主要的影响基因[]。它们调控着骨骼肌细胞的增殖分化过程以及后期肌纤维和肌管的融合过程。MRFs家族在骨骼肌肌细胞的决定和分化中都是必需的，但其在肌肉发育过程中的作用是不同的，主要分为两个阶段：肌肉发育初级阶段，MYOＤ和Myf5基因主要在成肌前体细胞的命运决定和成肌细胞增殖中起作用；肌肉发育次级阶段，MYOD和Myf6基因则在成肌细胞的融合和分化中起作用。研究发现,将小鼠的MYOD基因转入C3H成纤维细胞中可以诱导其出现成肌作用，证实了MYOD与肌肉发育紧密的相关性[]。对于成年动物，肌细胞的增殖和肌肉组织的增生可以经由MYOD和Myf5的表达量进行判断，MYOD调控着肌细胞的分化，而Myf5主要调节肌细胞的再生和动态平衡，二者的功能在胚形成期可以互相补偿，但成年期就失去了互补功能。如果MYOD表达受到阻遏，Myf5出现代偿性高表达，小鼠肌肉发育不受影响；若阻遏Myf5表达，则不能形成早期肌节，小鼠会因缺乏肌节与生骨节之间的相互作用而在出生时死亡。MYOD和Myf5都缺乏的小鼠，不能生成骨骼肌，肌卫星细胞也受影响[]。Myo D是肌管和肌纤维形成的必需因子，缺乏MYOD的鼠无肌纤维生成，但肌卫星细胞不受影响。Myf6调控肌管的分化，其蛋白活性缺失将导致肌肉发育不良，Myf6减少的小鼠能生成骨骼肌，但因肋骨生长缺陷而在出生时死亡。已有的试验也证明雄激素的水平含量对于肌肉发育也有正向作用。临床试验发现雄激素在使骨骼肌肥大的过程中，还伴随有骨骼肌肌肉力量的提升，并且肌肉力量的提升程度和雄激素的使用量以及生理活性之间有显著关系。而且肌肉力量的增加趋势与雄激素的使用量和生理活性呈高度相关。Schroeder等人的研究发现，老年男子在接受比睾酮效力稍低的雄激素注射后其瘦体重量和肌肉的最大力量均有提升[]。他们认为骨骼肌蛋白在雄激素的刺激下合成量增加是人体瘦体重增加的原因，由此推断注射生理剂量或者接近生理剂量的雄激素可以诱发骨骼肌蛋白质的额外表达并且提升肌肉力量。但是上述两方面的影响之间是否存在联系却鲜有报告可以佐证。因此试验将探寻雄激素是否是通过影响MRFs的表达水平从而影响骨骼肌的发育。
1 材料与方法
1．1 试验材料
200枚优质白羽肉鸡种鸡蛋。
1．2 种鸡蛋的分组以及孵化
将200枚种鸡蛋静置6小时，新洁尔灭消毒液稀释后均匀喷洒在试验用蛋表面进行初步消毒，标记每枚鸡蛋气室准确位置后分为三组。
（1）对照组（Control group）利用PBS缓冲液处理（共计60枚种蛋）。入孵前首次注射0.1mLPBS溶液处理鸡胚，以后每隔48小时使用PBS溶液处理鸡胚一次，从气室孔处注入0.1mLPBS溶液后封蜡继续孵育。

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