乳化剂对异硫氰酸丙酯消除常见霉菌毒素的效果影响【字数:10436】
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1 材料与方法2
1.1 材料2
1.1.1 试剂2
1.1.2 仪器2
1.2 方法2
1.2.1 乳化剂对AITC消除霉菌毒素的效果评估2
1.2.2 吸附剂中乳化剂对AITC消除霉菌毒素的效果评估3
1.2.3 HPLC法检测各霉菌毒素含量的设定条件3
2 结果与分析3
2.1 霉菌毒素标准品3
2.2 乳化剂对AITC消除霉菌毒素的效果评估4
2.2.1 消除玉米赤霉烯酮的效果评估4
2.2.2 消除黄曲霉毒素B1的效果评估4
2.2.3 消除呕吐毒素的效果评估5
2.3 吸附剂中乳化剂 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: #351916072#
对AITC消除霉菌毒素的效果评估5
2.3.1 消除玉米赤霉烯酮的效果评估5
2.3.2 消除黄曲霉毒素B1的效果评估5
2.3.3 消除呕吐毒素的效果评估5
2.4 实验不理想主要原因分析及改进措施6
2.4.1 试验方案原因及改进6
2.4.2 实验操作原因及改进7
2.4.3 仪器设备原因及改进8
3 讨论9
3.1 乳化剂对AITC消除常见霉菌毒素的效果影响及其应用前景9
3.2 HPLC法检测霉菌毒素含量9
致谢9
参考文献9
乳化剂对异硫氰酸丙酯消除常见霉菌毒素的效果影响
引言
霉菌毒素是霉菌在代谢过程中产生的次级有毒代谢产物,常存在于畜禽饲料及其原料中,品类繁多,包括玉米赤霉烯酮(ZEN)、黄曲霉毒素(AF)和呕吐毒素(DON)等[1]。摄入一定量的霉菌毒素,会使畜禽出现各种中毒症状,从而对其在生长繁殖、遗传和免疫应答等方面造成危害[2]。因此,探索霉变预防、毒素去除和病畜治疗的措施十分必要[3]。在现有的物理、化学及生物毒素去除方法中,吸附剂法因操作简单和经济高效得到了广泛应用[4]。
异硫氰酸丙酯(AITC)由黑芥子油酶解精炼而成,是芥末油的主要组成成分,具有强烈的挥发性和刺激性气味[5],不易溶于水。AITC是一种重要的调味料[6],还是一种广受关注的食品防腐剂[7],在较低浓度下对食品中常见的腐败菌、致病菌即有较强的杀灭作用。其特征基团N=C=S中的碳原子亲电性强,能与肽和蛋白质中的巯基和氨基结合形成共轭化合物——二硫代氨基甲酸酯和硫脲,从而抑制微生物的酶活性[8]。有研究表明,AITC在缓冲溶液中可与白地霉素和伏马菌素等霉菌毒素形成加合物,有可能降低此类毒素的毒性[9]。
乳化剂属于表面活性剂。在油/水 (O/W型) 乳浊液中,乳化剂通过其双亲能力降低水的表面张力,使水和油能形成稳定分散的胶体[10]。可用于动物饲料的常见O/W型乳化剂有溶血磷脂和胆汁酸盐等。其中,溶血磷脂的乳化效果受pH、温度和离子强度影响较小,且具有一定抗氧化能力[11]。胆汁酸盐为动物肝脏分泌的天然乳化剂,能将食物和血液中的油脂乳化成乳糜微粒,便于脂肪的吸收、转运和利用[12, 13]。
前期实验结果显示AITC与霉菌毒素的反应效率不高,效果不稳。这可能因为AITC属脂溶性而评价实验的反应环境是水溶液,AITC不能充分分散,降低了反应物之间的接触几率,进而限制了反应的速度和效率。故本课题拟通过添加乳化剂提高AITC在反应体系中的分散度,提高AITC和霉菌毒素的反应活性,为进一步改善现有霉菌毒素吸附剂产品性能奠定实验基础[14]。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 试剂 ZEN、AFL和DON固体标准品、溶血磷脂(单酰甘油磷脂)、胆汁酸钠(猪)、AITC (C4H7NS)和甲醇均为市购分析纯试剂,霉菌毒素吸附剂产品由江苏奥迈生物科技有限公司提供。
pH 7.0磷酸缓冲液:CaCl2:15 mM/L;Na2HPO4:18.5 mM/L;NaH2PO4H2O:31.5 mM/L,调节pH至7.0。
1.1.2 仪器 高速匀浆仪,磁力搅拌器,酸度计,恒温摇床,高效液相色谱仪及其配件,紫外吸收检测器,荧光检测器,其他实验室常规仪器和工具。
1.2 方法
1.2.1 乳化剂对AITC消除霉菌毒素的效果评估
(1)AITC乳化液制备:
初级乳化液——称取4份各重10.0g的AITC,分别加入溶血磷脂1.0g、溶血磷脂5.0g、胆汁酸钠0.2g或胆汁酸钠1.0g,使用pH 7.0磷酸缓冲溶液定容至100mL,制备成分别含溶血磷脂0.1 和0.5 g/g、含胆汁酸盐0.02 和0.1 g/g的4种初级乳化液。用前高速匀浆 (>10000 rpm)1 min *3次。
乳化工作液——吸取初级乳化液各10 mL,再次加入磷酸缓冲液定容至100 mL,制备成4种乳化工作液,用前高速匀浆 (>10000 rpm)1 min *3次;对照工作液——称取1.0 g的AITC,加入磷酸缓冲液定容至100 mL,用前充分混匀。
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