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牛源沙门氏菌生长与粘附性能研究【字数:7722】

2024-02-25 16:41编辑: www.jxszl.com景先生毕设
沙门氏菌属于人畜共患病病原菌,一直以来对公共健康有着极大威胁。沙门氏菌的生长和粘附性能与其危害程度密切相关。本实验以25株分别来自牛胴体拭子(S100~S104)、牛肛拭子(S105~S122)和牛肉样(S123~S124)的沙门氏菌为实验对象,测定其在37°C下培养36小时的生长曲线,并用Compertz模型和Baranyi模型进行曲线拟合和分析。发现25株沙门氏菌在36 h内均未出现衰退期;总体来说,从牛胴体拭子分离得到的沙门氏菌生长能力略差于从牛肛拭子和牛肉样中分离得到的沙门氏菌;S102用Baranyi模型拟合效果更好,其他24株菌用Compertz模型拟合效果更好。同时检测了上述25株沙门氏菌在37°C下于聚苯乙烯微孔表面的粘附情况,发现96%的沙门氏菌在聚苯乙烯表面有强成膜能力;88%的沙门氏菌粘附性能显著受时间影响,各菌株之间的粘附性能存在显著差异(P<0.05)。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言(或绪论)1
1 材料与方法2
1.1 材料与试剂 2
1.2 菌种 2
1.3 实验仪器2
1.4 实验方法2
1.4.1 菌种活化及接种2
1.4.2 生长曲线测定3
1.4.3 0.1%(m/v)结晶紫溶液配制3
1.4.4 粘附性能测定3
1.4.5 生物膜形成能力判定3
1.5 数据分析2
2 结果与分析3
2.1 沙门氏菌生长曲线3
2.2 沙门氏菌粘附性能8
3 讨论 9
致谢10
参考文献10
牛源沙门氏菌生长与粘附性能研究
引言
沙门氏菌是一种典型的食源性致病菌,能引起各种动物感染甚至中毒死亡,属于人畜共患病病原菌。沙门氏菌在自然界中分布广泛,可以通过病畜和带菌者的粪便、尿和乳汁等污染水源和饲料,从而传播疾病[1]。大量活菌伴随着被污染的食物一起被摄入后,不仅可以在肠道内继续繁殖并侵入肠粘膜引起粘膜的急性炎症反应,还可能经肠道进入血循环,导致急性 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: @351916072
败血症和全身各处发生局部感染。同时沙门氏菌属于革兰氏阴性菌,菌体溶解时,其细胞壁中的脂多糖被释放出来形成内毒素,刺激肠道的血管和神经,使肠粘膜肿胀、渗出、脱落,因而表现出呕吐、腹痛、腹泻和发热等症状[24]。
沙门氏菌在7~45°C的环境下均可生长,最适宜的生长温度为35~37°C[2]。微生物生长曲线反映了其在某种特定环境下活菌数量随时间增长而发生的规律性变化,通常可归纳为迟缓期、对数期、平稳期和衰退期等四个时期[5]。摄入的被污染食物中沙门氏菌的数量是决定感染程度的因素之一[2],运用数学建模的方式可以模拟在不同外部环境下微生物的生长情况,并对微生物生长动力学进行预测,从而评估微生物在整个生产制造过程中的风险[6]。粘附是细菌感染宿主细胞的第一步,也是至关重要的一步。粘附不仅使细菌能持续存在宿主细胞表面,还为细菌进一步侵入细胞打下了基础[7]。大量粘附细菌聚集在其自身分泌的聚合物基质中会形成生物膜[8],粘附在食品加工器械表面通过交叉污染加速食物的腐败变质[9]。
在沙门氏菌导致的食物中毒案例中,以被沙门氏菌污染的肉类及其制品引起的发病数最多[10]。不同肉类来源的沙门氏菌致病性有显著差异[11]。据统计,牛肉是我国近年来消费比例增长最快速的肉类之一[12],有实验结果表明牛源沙门氏菌对小鼠的致死率可高达80%[13]。因此,研究牛源沙门氏菌的基本特性,对于保障市场上牛肉及其制品的安全、进一步完善肉类产业的食品安全具有重要意义。目前,国内对牛源沙门氏菌的研究还比较少,已有的文献报导内容也倾向于不同血清型之间粘附能力和致病性等方面的差异[14],对不同来源,例如从粪便和内脏中分离得到的沙门氏菌之间的差异研究较少。本实验以分别从牛胴体拭子(5株)、牛肛拭子(18株)和牛肉样(2株)中分离得到的25株沙门氏菌为研究对象,检测其生长性能和粘附性能,并用微生物学中常用的初级模型:Compertz模型和Baranyi模型[15]对25株沙门氏菌的生长曲线进行曲线拟合和分析,以期促进对牛源沙门氏菌的研究进展,找到预测牛源沙门氏菌生长的最佳模型,更好地为食品安全提供保障。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
胰蛋白胨大豆肉汤(Trypticase Soy Broth, TSB)、木糖赖氨酸脱氧胆盐(Xylose Lysine Desoxycholate, XLD)琼脂购自青岛高科园海博生物技术有限公司;乙醇(95%)购自南京化学试剂股份有限公司;结晶紫购自天津市化学试剂研究所;生长曲线测定仪专用细胞孔板购自上海谓载商贸发展有限公司,96微孔聚苯乙烯细胞培养板购自美国Coming公司。
1.2 菌种
S100~S104号沙门氏菌从牛胴体拭子中分离得到、S105~S122号沙门氏菌从牛肛拭子中分离得到、S123~S124号沙门氏菌从牛肉样中分离得到。上述25株沙门氏菌的冻存液由大学国家肉品中心微生物实验室保存于80°C冰箱。
1. 3 实验仪器
BIOⅡAdvance4 Sterile GARD生物安全柜 西班牙Telstar公司
SN•SQ•SQL系列立式压力蒸汽灭菌器 重庆雅马拓科技有限公司
PL202L天平 瑞士Mettler Toledo公司
MilliQ超纯水系统 美国Millipore公司
Bioscreen全自动生长曲线分析仪 上海谓载商贸发展有限公司
SPX250BZ型生化培养箱 上海博讯实业有限医疗设备厂
WH2微型旋涡混合仪 上海沪西分析仪器有限公司

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