目录
摘要1
关键词1
Abstract2
Key words2
引言3
1材料与方法5
1.1试验材料和仪器5
1.1.1试验材料5
1.1.2试验菌种5
1.1.3试验仪器5
1.1.4 PCR引物列表5
1.2方法5
1.2.1常用培养基及试剂的配制6
1.2.2聚合酶链式反应（PCR）6
1.2.3 DNA琼脂糖凝胶电泳回收7
1.2.4热激法转化大肠杆菌感受态细胞7
1.2.5菌落鉴定的反应体系7
1.2.6快速提取质粒7
1.2.7 TRIzol Reagant法提取总RNA8
1.2.8 Immunonorthern blot法8
2结果与分析9
2.1 ac4C修饰在植物中的分布情况9
2.2 拟南芥乙酰化转移酶同源基因突变体生长表型分析9
2.2.1 进化树分析10
2.2.2 单突纯合突变体鉴定10
2.2.3 atgant1、atgant2双突纯合突变体鉴定11
2.2.4 拟南芥突变体生长表型观察11
2.3 AtGANT2介导18S rRNA的ac4C修饰12
3讨论13
3.1 ac4C修饰普遍存在于单子叶和双子叶植物13
3.2 拟南芥AtGANT1/2基因对植物生长发育的重要性13
3.3 ac4C修饰对18S rRNA剪切的影响与分析13
4结论14
致谢14
参考文献14
拟南芥中ac4C修饰的机制研究
摘 要
ac4C（N4acetylcytidine）是胞嘧啶C4位NH2发生的乙酰化修饰。早期研究大多是在酵母和人类中，发现ac4C修饰调节核糖体翻译保真度、翻译效率和mRNA的稳定性。然而，植物中ac4C修饰的相关研究还十分欠缺。本研究采用反向遗传学的方法，通过进化树分析，我们在拟南芥 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072# 
中鉴定到GNAT类型乙酰转移酶的两个同源基因AtGNAT1和AtGNAT2。通过对atgnat1和 atgnat2突变体的生长表型分析，发现AtGNAT1和AtGNAT2在拟南芥生长发育过程中起到重要作用。虽然atgnat1和 atgnat2单突变体和野生型相比没有表现出明显的生长表型差异，但是atgnat1/2双突变体致死，且基因型为atgnat1/2（ /+ ）和atgnat1/2（+ / ）的突变体表现出显著的生长表型缺陷。利用ImmunoNorthern blot技术，我们证明AtGNAT2催化18S rRNA的ac4C修饰，同时发现ac4C修饰普遍存在于单子叶植物和双子叶植物中，并主要存在于18S rRNA和Small RNAs上。本研究填补了植物中ac4C修饰研究的空白，并为ac4C修饰的生物学功能研究奠定基础。

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