目的研究底物、糖基供体和酶对莱鲍迪苷A(RA)生物合成的影响，探讨影响RA生物合成的关键因素，初步探明RA生物合成途径，为进一步提高甜叶菊中RA含量的分子育种工作提供依据。方法分别在全酶、硫酸铵沉淀蛋白和UGT76g1两种类型酶蛋白催下，以STV、RB和RC为底物，以UDPG或ADPG为供体，高效液相分析，检测RA、STV和RC等化合物的含量变化情况。结论 RA生物合成途径的底物是STV，糖基供体对此促进效果比较弱，且该反应是可逆反应，两种UGT76g1酶蛋白都会促使RA分解生成STV；RB和RC在一定的酶蛋白和糖基供体条件下可生转化为RA和STV。
目录
摘要 4
关键词 4
Abstract 4
Key words 4
1 仪器与试剂 5
1．1 仪器 5
1．2 试剂 5
1．3 材料 5
2 实验方法和结果 5
2．1 实验方法 5
2．1．1 色谱条件 5
2．1．2 标准品溶液的制备 5
2．1．3探究干粉和新鲜叶子在全酶条件下与RA生物合成途径相关的底物和糖基供体 5
2．1．4 探究干粉和新鲜叶子在硫酸铵沉淀法处理条件下与RA生物合成途径相关的底物和糖基供体 5
2．1．5 探究UGT76g1单酶条件下与RA生物合成途径相关的底物和糖基供体 5
2．1．6 稳定性试验 6
2．1．7 重复性试验 6
2．2 结果与分析 6
2．2．1 全酶条件下使用不同酶来源的结果比较 6
2．2．2 硫酸铵沉淀法处理不同酶来源的结果比较 7
2．2．3 UGT76g1野生型和突变型酶蛋白实验组的结果比较 9
3 讨论 12
致谢 13
参考文献： 13
图1 全酶条件下以STV为底物反应测得的RA和STV含量比较.....6
图2全酶条件下以RB为底物反应测得的RA和STV含量比较.....7
图3全酶条件下以RC为底物反应测得的RA、STV和RC含量比较....7 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: #351916072# 

图4硫酸铵沉淀法以STV为底物反应测得的RA和STV含量比较....8
图5硫酸铵沉淀法以RB为底物反应测得的RA和STV含量比较......8
图6硫酸铵沉淀法以RC为底物反应测得的RA、STV和RC含量比较....9
图7底物对RA、STV和RC含量影响比较.....9
图8野生型酶蛋白对RA、STV和RC含量影响比较......10
图9突变型酶蛋白对RA、STV和RC含量影响比较......10
图10 UGT76g1酶蛋白条件以STV为底物反应测得的RA和STV含量比较....11
图11 UGT76g1酶蛋白条件以RB为底物反应测得的RA和STV含量比较.11
图12 UGT76g1酶蛋白条件以RC为底物反应测得的RA和STV含量比较.12
甜叶菊莱鲍迪苷A生物合成途径解析

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