为探讨土壤磷对活血丹化学性成分的影响，确定活血丹活性成分含量高时的土壤最适用量，以野生活血丹扦插苗为试验材料，采用盆栽实验法，通过对活血丹进行不同浓度的土壤磷处理，测定活血丹中主要药用活性成分的含量。结果表明适当提高土壤中含磷量可以提高活血丹的醇溶性浸出物含量，活血丹中熊果酸含量显著高于齐墩果酸含量，施磷量对齐墩果酸的影响不明显，施磷量在0.6~0.9g·kg-1时黄酮类化合物，熊果酸含量最高，同时活血丹中迷迭香酸含量显著高于绿原酸与咖啡酸，并在施磷量达到0.6g·kg-1时酚酸类成分达到最大值。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言4
1.材料与方法5
1.1材料 5
1.2试剂与仪器 5
1.3方法5
1.3.1试验设计5
1.3.2样品采集测定6
1.3.3统计与分析6
2结果分析6
2.1土壤磷对活血丹醇溶性浸出物和总黄酮含量的影响............................6
2.2土壤磷对活血丹内三萜酸类成分的影响........................................7
2.3土壤磷对活血丹内酚酸类成分的影响.......................................8
3讨论9
3.1土壤磷与活血丹醇溶性浸出物和黄酮类化合物相关性...9
3.2土壤磷与活血丹三萜酸含量相关性...................................9
3.3土壤磷与活血丹酚酸类含量相关性...................................9
4结论10
致谢10
参考文献11
土壤磷对活血丹化学成分的影响
引言
磷是植物生长发育的必需营养元素之一，缺磷时，植物细胞分裂迟缓，新细胞难以形成，影响植物的营养生长，磷过量时，由于植物呼吸作用增强，消耗大量的糖分和能量，也会因此产生不良影响[ *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
1]植物吸收磷不仅取决于磷从土壤中的解析分解，还取决于植物本身的特性。在相同地域的同类型土壤上，磷的效率一般通过根系对磷的吸收效率和利用效率2个方面来体现[2]。在植物生长过程中，植物根系形态（主要包括根的长度和表面积，根轴直径的大小，根毛和侧根的数量等）和根构型对植物吸收土壤中磷素养分的吸收具有非常显著的影响[3]；随着施磷量的增加，植株有效成分也受到影响，如随着施磷量的增加，株高、茎粗、叶面积指数、新梢鲜重、地上部干重、茎含油量、叶片含油量、全株含油量和单株含油量均显著增加。广藿香不同组织中N、P、K的含量也逐渐增加，而磷含量大幅度增加，对其它矿质元素的吸收有一定的影响[4]。窦宏涛等[5]研究发现不同磷浓度对挥发油种类的影响不明显，对薄荷脑精油的相对含量有明显影响。随着磷水平的增加，薄荷挥发油中主要成分香芹酮的相对含量逐渐增加，而与总氮、蛋白质、磷的含量呈显著正相关。结果表明，高磷浓度有利于薄荷精油中香芹酮的转化。
唇形科植物活血丹，干燥地上部分入药，有利湿通淋，清热解毒，散癣消肿的功能。活血丹喜爱阴冷潮湿环境，最适宜条件为疏松、肥沃、排水良好的砂质壤土，土壤要求不严格，但最适合其生长的还是温暖湿润的环境。质量标准收载于《中华人民共和国药典（2015 年版一部）》，味辛、微苦，性微寒，归肝、肾、膀胱经；具有清热解毒，利尿排石，散瘀消肿功效［6］。目前对活血丹的研究多为其内在元素及有效成分的测定，如已测定不同生长期活血丹中8种营养元素含量，建立了活血丹营养元素指纹图谱[7]。活血丹中主要含有三萜类、黄酮类、以及挥发油、无机盐等化学成分，但是较多是对所含主要成分三萜类进行分析测定和品质评价的。三萜类化合物以熊果酸为主要组成成分，其生物化学效应也尤为明显，如其可以镇静，帮助患者降低血糖，稳定情绪等，同时还具有明显的抗氧化功能，是活血丹的特征性化学成分［89］，许多中药材及其制剂常选用熊果酸的含量作为其质量控制指标。三萜类的另一主要成分为齐墩果酸（Oleanolic acid，OA）主要有保肝、降转氨酶[10]、降脂降糖、抗炎、强心利尿、抗突变抗癌等作用[11]。
黄酮类化合物也是活血丹中较多存在的成分，具有较强的生物活性［1213］，如臭灵丹中黄酮类化合物对多种亚型的流感病毒有体外抑制作用，臭灵丹总黄酮体外能抑制流感病毒诱导的细胞调亡[14]，黄酮类化合物对多种常见癌症皆有显著的防治效果,黄酮类化合物抗肿瘤的机制主要有: 抗氧化抗自由基、抑制端粒酶活性等[15]。活血丹中还含有较多的酚酸类化合物，酚酸类化合物在抗氧化、抗菌消炎、降血脂等方面有很强的药理作用［16］，酚酸类化合物同时具有抑制羟自由基、过氧自由基及过氧亚硝基引起的 DNA 损伤的作用［17］，其中总黄酮采用超声提取法进行提取，其含量采用分光光度法［18］进行测定，齐墩果酸与熊果酸采用超声法提取，HPLC法测定含量［19］。
由于土壤磷的重要作用和活血丹中黄酮类化合物及酚酸类化合物这几种重要的具有活性的药效物质，通过对活血丹苗的不同浓度的磷处理，测定活血丹体内指标性成分含量，以及萜酸类、黄酮类成分等含量为指标，以明确土壤磷处理对活血丹指标性成分的影响，从而确定活血丹活性成分含量高时的土壤磷最适用量，探索磷元素对活血丹指标性成分的影响。
1. 材料与方法
1.1材料
试验土壤由园土，蛭石和有机质组成，它们的体积比例为3:1:1，取其中混匀的200g土壤做初始磷测定。活血丹采自江苏省南京市紫金山附近，经大学中医药研究所郭巧生教授鉴定为活血丹。2017年11月在大学中药材研究所试验大棚扦插育苗备用，2018年3月中旬选择长势一致的健壮活血丹幼苗进行栽培试验,实验试验设置了 6个施磷水平，分别为 0、1.51、3.02、4.53、6.04，7.55 g NaH2PO4/盆，并用 P1、P2、P3、P4、P5 和P6表示，磷肥品种为磷酸二氢钠（NaH2PO4），待一个月后，测量有效成分含量。
1.2试剂与仪器

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