：目前，关于高盐条件下植株水平K+稳态的离子机制的研究却很少。在盐胁迫的外界环境下，Na+主要通过非选择性系统（如NSCCs）进入根部共质体途径，K+一般通过膜上专一性的离子转运通道进入，因此，K+转运系统展开分子机制和功能特性的研究对于提高植物耐盐能力有十分重要的意义。本毕业设计从3个方面研究OsSTK1的生理功能。第一个是以水稻Dongjin野生型和osstk1为研究材料，在盐胁迫处理下进行表型观察；第二个是双电极电压钳实验检测导入OsSTK1载体的非洲爪蟾卵母细胞，鉴定OsSTK1的离子通道活性；第三个是测定盐处理下osstk1突变体的离子含量。本研究发现OsSTK1具备K+离子通道活性，其功能缺失引起了水稻幼苗对盐胁迫的敏感性和钠离子含量的显著升高，初步证实了OsSTK1可能在水稻适应盐胁迫过程中发挥调节离子平衡的作用。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key word 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 实验材料 2
1.1.1 植物材料 2
1.1.2 实验中所用宿主菌和载体质粒 2
1.1.3 各种酶、试剂 2
1.1.4 常用培养基的配制 2
1.2 实验方法 3
1.2.1 载体构建 3
1.2.1.1 PCR克隆OsSTK1的编码序列 3
1.2.1.1.1 目的片段的扩增 3
1.2.1.1.2 琼脂糖胶回收DNA片段 3
1.2.1.1.3 PCR产物平末端的加A反应 3
1.2.1.1.4 目的片段与载体连接 4
1.2.1.1.5 连接产物转化大肠杆菌 4
1.2.1.1.6 阳性克隆的筛选与鉴定 4
1.2.1.2 将扩增后的目标片段与蛙卵表达载体连接构建新质粒 5
1.2.1.2.1 双酶切 5
1.2.1.2.2 连接反应 5
1.2.1.2.3 阳性克隆筛选与鉴定 6
1.2.2 电生理学检测 6
1
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.2.2.1 蛙卵表达载体的线性化 6
1.2.2.2 蛋白酶K处理： 6
1.2.2.3 体外转录成cRNA 6
1.2.2.4 注射蛙卵 7
1.2.2.5 双电极电压钳实验检测记录电流 7
1.2.3 表型检测 7
1.2.3.1 水稻种子培养条件 7
1.2.3.2 观察表型 8
1.2.4 离子含量测定 8
2 结果与分析 8
2.1 OsSTK1的爪蟾卵母细胞表达载体构建 8
2.2 双电极电压钳实验 8
2.3 OsSTK1的TDNA插入突变体对盐胁迫下的表型 9
2.4 盐处理下突变体离子含量测定 10
3 讨论 11
致谢 12
参考文献 12
OsSTK1在水稻适应盐胁迫过程中的生理功能研究

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