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水稻内生细菌2p对水稻白叶枯病害的抑制及机制初探【字数:8695】

2024-02-24 17:55编辑: www.jxszl.com景先生毕设
本次实验主要研究对象是一种从感染白叶枯病的水稻植株之中分离出的紫色内生细菌2P,通过前期初步实验,发现2P对水稻白叶枯病的发生与危害有一定的抑制作用。为进一步探究2P菌生物学特性以及防病机制,本文对2P菌进行了它对常见抗生素的抗性分析、侵入定殖情况、存在部位、对水稻的致病作用试验,并通过液体培养基中和在植株体内与病原菌PXO99混合培养,测定两种菌生长曲线等方式研究其抗病机制,为研究其今后能否作为生防因子在防治水稻白叶枯病进程中大量推广作一个有效参考。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
第一章 内生细菌2P对8种常见抗生素抗性研究2
1 材料与方法2
材料 2
供试菌株和培养基2
抗生素 2
1.2 方法 2
1.2.1 试验菌株培养方法2
1.2.2 水稻种植2
1.2.3 内生细菌2P对水稻的致病性测定2
2结果与分析2
2.1 2P菌抗性反应测定结果2
2.2 PXO99抗性反应测定结果3
3 讨论 3
第二章 内生细菌2P对水稻白叶枯病抑制效果初探4
1 材料与方法4
材料4
水稻品种4
培养基4
实验菌株4
1.3 方法 4
1.3.1 试验菌株培养方法4
1.3.2 水稻种植4
1.3.3 内生细菌2P对水稻的致病性测定4
1.3.4 水稻种子萌发实验4
1.3.5 内生细菌2P在水稻中侵入定殖试验5
1.3.6 内生细菌2P与PXO99的相互作用试验5
2结果与分析6
2.1 内生细菌2P对水稻的致病性6
2.2 水稻种子萌发试验结果7
2.3 内生细菌2P在水稻中侵入定殖试验结果7
2.4 2P菌与PXO99混合接种试验结果8
2.5 2P菌与PXO99菌混合培养生长曲线 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072
的测定9
3 讨论10
3.1 2P菌对水稻的致病性及侵入定殖机制初探11
3.2 2P菌对水稻水稻白叶枯病抑制机制初探11
致谢12
参考文献12
水稻内生细菌2P对水稻白叶枯病害的抑制及机制初探
引言
引言
水稻白叶枯病是水稻的主要病害之一,由水稻黄单胞杆菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)引起,主要发生在叶片、叶脉上,它最早于1884年在日本福冈县发现, 目前世界各稻区均有发生,在我国一些南方稻区中,常常发现凋萎型白叶枯病——主要发生在秧田生长后期和本田移植1周内,由于感病后发生的“失水、卷曲、凋萎”等病状,对水稻生产造成重大影响[1]。
植物内生细菌定殖于植物体内,与寄主植物在长期进化过程中形成了和谐共生关系,对寄主植物具有防病、固氮、促生和生物修复等生物学作用,目前已被广泛应用于植物病害的生物防治[2]。
本次实验主要研究对象是一种从感染白叶枯病的水稻植株之中分离出的紫色内生菌2P,通过前期初步实验,发现2P对水稻白叶枯病的发生与危害有一定的抑制作用。因此,我们对它进行进一步的观察研究,例如其在水稻内作用机制与促生性,对水稻白叶枯病防治效果及抑制机制等,为将来它能否在生产中大量推广提供一定的参考。
内生细菌2P对8种常见抗生素抗性研究
在水稻内生细菌2P前期的研究过程中,已知内生细菌2P是一种具紫色色素的革兰氏染色阳性细菌,菌落颜色为黄色,圆形、突起、不透明、边缘平整、质地干燥。为了更好地探究2P在水稻中的定殖能力及生防作用,提高2P菌接种回收效率,我们对2P菌与供试水稻白叶枯病病原菌株PXO99对常见抗生素的抗性反应作一个初步研究,筛选适宜的抗生素对2P菌及PXO99进行抗性标记[3]。
1 材料与方法
1.1 材料
供试菌株和培养基
分离于感染水稻白叶枯病的水稻叶片的内生细菌2P,水稻白叶枯病菌PXO99。
NA培养基(牛肉膏蛋白胨培养基):牛肉膏3g,葡萄糖20g,蛋白胨5g,琼脂17g,蒸馏水1000ml,pH7.0[4]
抗生素
氨苄青霉素(Ap),利福平(Rif),壮观霉素(Sp),卡那霉素(Km),庆大霉素(GTm),头孢霉素(Cef),氯霉素(Cm),萘啶酮酸(Nar)
方法
待测菌株的活化方法
将菌株2P与PXO99分别划线接种于NA培养基上,置于28℃培养箱中培养2~3d[5]。
抗性反应测定
本试验测定了2P与PXO99分别对氨苄青霉素(Ap),利福平(Rif),壮观霉素(Sp),卡那霉素(Km), 庆大霉素(GTm),头孢霉素(Cef),氯霉素(Cm),萘啶酮酸(Nar)不同浓度的抗性反应。
将上述抗生素溶解配置成一定浓度的溶液,除菌后加入已灭菌并冷却至50℃的NA固体培养基中,使其终浓度分别为10、20、50μg/mL,共设4个重复,以不加抗生素的NA平板为对照。接种后于28℃培养箱培养,48h之后观察菌株生长情况。
2 结果与分析
2.1 2P菌对抗生素抗性反应测定结果
由表1可知,2P菌在三种浓度的利福平,萘啶酮酸,卡那霉素抗生素平板上都可以生长,在10μg/mL和20μg/mL的氨苄青霉素和头孢霉素上可以生长,在50μg/mL则不能生长。另外,2P菌在所测试的任何浓度的壮观霉素,庆大霉素,氯霉素抗生素平板上都不可以生长。

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