黄芪多糖对蚂蟥生长免疫和内在品质的影响【字数:5186】
目录
摘要 4
关键词 4
1.实验材料与方法 5
1.1实验材料 5
1.4实验方法 5
1.4.1生长性能的测定 6
1.4.2消化酶和和抗逆酶活性的测定 6
1.4.3蚂蟥内在品质测定 7
2.实验结果与分析 7
2.1黄芪多糖对蚂蟥生长性能的影响 7
2.2黄芪多糖对蚂蟥酶活力的影响 7
2.2.2抗逆酶 8
2.3黄芪多糖对蚂蟥内在质量的影响 9
3讨论 9
3.1黄芪多糖对蚂蟥生长性能的影响 9
3.2黄芪多糖对生物酶活性影响...............................................................................................9
致 谢 10
参考文献 11
黄芪多糖对蚂蟥生长、免疫和内在品质的影响
引言
蚂蟥 Whitmania pigra 是 2015 年版《中国药典》药材水蛭的主要基原动物之一,具有破血通经,逐瘀消癥的作用。常用于跌扑损伤,血瘀经闭,中风偏瘫[1]。在现代研究手段下,蚂蟥更多的医药价值被开发出来,如抗肿瘤、治疗冠心病和高血压等,还可用于断肢再植的术后辅助治疗。蚂蟥体内的水蛭素除了作为抗凝血剂之外,还能通过抑制凝血酶活性产生抗肿瘤作用来抑制肿瘤细胞的增值及其转移[3]
APS作为黄芪的主要活性成分,具有免疫调节、抗肿瘤 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: &351916072&
、抗氧化、降血压、降血糖和肝肾保护等广泛的药理作用。APS 来源较广、资源丰富、价格低廉、毒副作用小、在体内无残留、不产生耐药性,因而备受重视[3],黄芪的成分包括黄芪多糖(APS)、生物碱、黄酮、叶酸以及多种微量元素,其中黄芪多糖是主要成分,具有广泛的药理作用。黄芪不仅是一味常用的补气药材,而且还是一种功效显著的食疗药材,具有药食两用的功效。食疗中常以黄芪为主配以其他辅材,作为保健防病的食疗配方。近年来,黄芪以其出众的免疫调节功效赢得了越来越多的关注[4]。黄芪多糖是中药黄芪的主要天然生物活性成分。据文献报道,黄芪多糖具有增强机体免疫的功能。增加机体主要免疫器官脾和法氏囊等的质量,增加白细胞和淋巴细胞数量,提高淋巴细胞转化率和巨噬细胞活性及诱导干扰素产生等作用,对多种疫苗具有免疫增强的作用[5]。黄芪多糖(APS)是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根经提取、浓缩、纯化而成的水溶性杂多糖,淡黄色,粉末细腻,均匀无杂质。黄芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等组成[6]。
此次实验基于单一变量的实验准则,研究了黄芪多糖对蚂蟥生长性能、蚂蟥酶活力、蚂蟥内在品质的影响,并探讨了黄芪多糖在使用过程中的最佳添加范围。
1.实验材料与方法
1.1实验材料
蚂蟥,由大学中药材研究所提供,经郭巧生教授鉴定为蚂蟥Whitmania pigra Whitman。黄芪多糖,购自格润动物药业有限公司,产品执行标准为Q/GR012011。
1.2实验仪器
GZX智能型光照培养箱(宁波江南仪器厂)、756CRT紫外分光光度计(上海精密仪器有限公司)、FW100小型高速粉碎机(天津华鑫仪器厂)、HHS型水浴锅(巩义市予华仪器有限责任公司)、FA1104分析天平(上海精科天平)、电子天平(山海精密仪器厂)、5810R离心机(Eppendorf)。
1.3实验试剂
二硝基水杨酸(DNS)、钼酸铵、福林酚、干酪素、对硝基苯磷酸二钠、3,5二硝基水杨酸、对棕榈酸硝基苯酯(ρNPP)、G250考马斯亮蓝、邻苯三酚。
1.4实验方法
本实验在室温为27±1℃室内进行,将体重0.16±0.03g健康蚂蟥养殖在2L塑料瓶,每瓶10条,设1个空白对照组和5个黄芪多糖浓度组,使养殖水中黄芪多糖浓度分别为0‰,0.01‰,0.03‰,0.05‰,0.07‰,0.09‰。每组10瓶,实验开始前对各组蚂蟥进行一次称重,确保每组蚂蟥质量相同。饲养管理条件相同条件下,养殖60天称量蚂蟥体重,每组随机取20条蚂蟥放在冰块上解剖取消化道,进行相关酶活的测定,同时将解剖后蚂蟥阳光下晾干,做内在品质的测定。
1.4.1生长性能的测定
60天养殖实验结束后,根据以下公式计算蚂蟥特定生长率(SGR)、存活率(SR)、增重率(WGR)。式中W0为实验开始时蚂蟥的平均质量(g),实验天数为t(d),W1为实验结束时蚂蟥的平均质量(g)。
SR(%)=100×(总条数死亡条数)/总条数。
SGR(%)=100×(lnW1lnW0)/t;
WGR(%)=100×(W1W0)/W0。
1.4.2消化酶和和抗逆酶活性的测定
(1)酶液制取
取饲养60天后的各组蚂蟥,麻醉10min,固定于冰盘内进行解剖,取出整个内脏消化道,剔除其附着物,用预冷的蒸馏水洗净,用滤纸吸干组织表面水分,称重,冰浴中进行匀浆,同时加蒸馏水,稀释成含原浆20%的溶液,4℃冷冻离心15 min( 8000 r/min),所得上清液为酶液,置于4℃冰箱中低温保存,24 h内测定完成。(上层为脂肪,下层为组织沉淀,中层为酶液层)酶活力是指酶催化某些化学反应的能力。酶活力的大小可以在一定条件下它所催化的某一化学反应的速度来变化。
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