秦岭龙胆中多酚的抑菌及抗氧化活性研究
目 录
郑 重 声 明 Ⅰ
目 录 Ⅳ
1 绪 论 1
1.1研究背景及意义 1
1.2秦岭龙胆的研究进展 1
1.2.1秦岭龙胆简介 1
1.2.2秦岭龙胆中主要成分 2
1.2.3龙胆在防治疾病方面的疗效 2
1.3多酚的研究进展 3
1.3.1多酚的简介 3
1.3.2多酚的抑菌作用 3
1.4多酚的抗氧化活性研究 4
1.4.1清除活性氧和自由基 4
1.4.2螯合作用 4
1.4.3抑制酶的活性 4
1.4.4激活作用 4
1.5常见的多酚抑菌研究方法 5
1.6常见的多酚抗氧化活性研究方法 6
1.6.1DPPH清除法 6
1.6.2ABTS自由基阳离子清除法 6
1.6.3脂质过氧化抑制法 7
2 实验研究 8
2.1试药与仪器 8
2.1.1试药 8
2.1.2仪器和试剂 8
2.2实验方法 9
2.2.1抗氧化技术路线图 9
2.2.2秦岭龙胆的预处理 10
2.2.3秦岭龙胆多酚的提取 11
2.2.4秦 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: &351916072&
岭龙胆多酚溶液的配置 11
2.2.5阳性对照品BHT和抗坏血酸溶液的配置 11
2.2.6秦岭龙胆多酚对DPPH清除率活性测定 11
2.2.7秦岭龙胆多酚对ABTS自由基阳离子清除实验 12
2.3结果与分析 12
2.4秦岭龙胆多酚的抑菌研究 14
2.4.1抑菌技术路线图 15
2.4.2菌悬液的制备 15
2.4.3龙胆多酚溶液样品的配制 15
2.4.4滤纸片的制备 15
2.4.5含菌平板的制备 15
2.4.6抑菌性测定 16
2.5结果分析 16
结 论 17
参考文献 19
致 谢 22
1 绪 论
1.1研究背景及意义
龙胆为龙胆科植物,在全国大部分省份皆有分布,其中以秦岭一带龙胆药效较为突出。龙胆全草皆可药用,味苦,性寒,具有调经活血、清热燥湿、保肝明目、泻肝定惊等功效。有研究成果表明,秦岭龙胆内含有酚性成分,黄酮类及其衍生苷,内酯类化合物、香豆素及其甙类,糖类,甾萜类成分,生物碱类,有机酸和挥发油等[1]。而我注意到,少有学者对其中的酚性成分进行大量研究。因此本实验旨在为龙胆资源的高效开发利用提供理论依据。
多酚广泛存在于植物根茎叶皮肉中,属于多羟基类化合物。因其在植物中分布广泛,所以在自然资源中含量丰富。多酚是已发现的天然活性物,由于其羟基取代的高反应性和吞噬自由基的能力,因而具有很好的抗氧化活性[2]。能显著清除生物体中所含的自由基,减缓机体衰老,预防多种疾病。其在一定程度上能极大地促进人体健康。本论文拟以95%乙醇为溶剂,采用回流法提取秦岭龙胆中的多酚成分,并对所提取物进行体外抑菌和抗氧化研究。实验中常用滤纸片法通过抑菌圈直径的大小来判断多酚的抑菌活性。对于其抗氧化性还通过研究秦岭龙胆多酚对ABTS及DPPH自由基的清除率以及通过比较Vc对照组来评价其清除率的强弱。目前,有关龙胆多酚的抑菌及抗氧化活性研究鲜有报道,本实验以期为秦岭龙胆中多酚成分的高效利用提供理论依据。
1.2秦岭龙胆的研究进展
1.2.1秦岭龙胆简介
龙胆为龙胆科植物,在全国大部分省份皆有分布,其中以秦岭一带龙胆药效较为突出。龙胆全草皆可药用,味苦,性寒,具有调经活血、清热燥湿、保肝明目、泻肝定惊等功效。出自《陕西中草药》,特产于陕西秦岭、太白山。
1.2.2秦岭龙胆中主要成分
经定性研究发现,龙胆中发挥主要药效的成分为口山酮类及环烯醚帖类成分[3]。王宁等[4]对秦岭龙胆进行定性分析,并用薄层预试法对部分检验对象进行验证,结果发现其主要含有黄酮及其苷类化合物,生物碱类等成分。李映丽等[5]对秦岭龙胆进行了药品质量检测和定性分析,通过分析得出其中含有甾体,三萜类和糖、苷类等成分。而我注意到,少有学者对其中的酚性成分进行大量研究,因此本实验旨在为龙胆资源的高效开发利用提供理论依据。
1.2.3龙胆在防治疾病方面的疗效
现代药理机制研究表明,龙胆具有能促进胃酸和胃液分泌的作用,还具有保护肝脏、抗炎、兴奋中枢神经、促进排便、抑菌等作用。
1.2.3.1对消化系统作用
龙胆能促进胃肠道中胃液的分泌,导致其中游离酸成分分泌量增加,进一步影响了胆汁的分泌量,使其分泌增多。
1.2.3.2抗炎镇痛作用
Hidetoshi Yamada、Rushendhiran Kesavan[67]用体外实验从细胞水平验证了龙胆的抗炎作用,朴慧顺[8]经小鼠体内实验证明了龙胆具有抗炎镇痛作用。龙胆具有的抗炎镇痛作用不仅在实验室得到验证,而且在临床上也被广泛运用治疗各种炎症。
1.2.3.3对神经保护作用
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