摘 要黑果枸杞是一种常用中草药，药理活性主要来源于其含有的多糖。常规提取方法获得的是粗多糖，其中含有较多杂质。本文选择采用PEG2000/NaH2PO4双水相体系对黑果枸杞粗多糖进行脱蛋白纯化的研究，具体内容为考察NaH2PO4成相盐的浓度、PEG2000的浓度、粗多糖溶液的添加量以及温度等因素对黑果枸杞多糖在双水相系统中的多糖回收率和蛋白质残余率的影响。实验结果表明当温度为35(C、NaH2PO4的浓度为20%、PEG2000的浓度为22%、粗多糖溶液的添加量为2.5g，体系总质量为10 g时，体系的萃取分离效果达到了最优。在此优化条件下，下相中多糖的回收率达到97.4%，而蛋白质在下相中的残留率仅为10.4%，此结果为萃取黑果枸杞多糖提供了新的方法。
目 录
1 引言 1
1.1 黑果枸杞概述 1
1.1.1 黑果枸杞 1
1.1.2 黑果枸杞的实用价值 1
1.1.3 国内外关于该论题的研究和发展现状 3
1.2 双水相萃取技术 3
1.2.1 双水相萃取技术的原理 3
1.2.2 双水相技术的应用 3
1.3 论文选题 4
2 实验部分 5
2.1 实验材料及仪器 5
2.1.1 实验材料、试剂 5
2.1.2 实验仪器 5
2.2 实验方法和步骤 6
2.2.1 黑果枸杞粗多糖的提取 6
2.2.2 苯酚溶液的配置 6
2.2.3 考马斯亮蓝溶液的制备 6
2.3 多糖含量的测定方法 7
2.3.1 葡萄糖标准曲线的制作 7
2.4 蛋白质含量的测定方法 7
2.4.1 蛋白质标准曲线的制作 8
2.5 双水相体系的配置 8
2.6 萃取效果图 9
2.7 单因素试验 9
3 结果与分析 11
3.1磷酸二氢钠对黑果枸杞粗多糖中杂质蛋白去除率的影响 11
3.2 PEG2000浓度对黑果枸杞粗多糖中杂质蛋白质去除率的影响 12
3.3加入粗多糖的量对黑果枸杞 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072# 
粗多糖中杂质蛋白质去除率的影响 15
3.4温度对黑果枸杞粗多糖中杂质蛋白质去除率的影响 16
结论 19
参考文献 20
致谢 22
1 引言
1.1 黑果枸杞概述
1.1.1 黑果枸杞
黑果枸杞即黑枸杞LyciunmRuthenicunmMurrPolyasaccharides(LRPs)[1]，它属于茄科枸杞属，是常年生有很多分枝的灌木，长得比较低矮，花叶簇生，叶肉肥厚，枝是白颜色的，数量特别多而且枝条强硬，经常呈现为“之”字的形态[2,3]。花梗细瘦其花萼形似狭钟状，花冠形状似漏斗状，花色为淡紫色且裂片一般为矩圆状或椭圆形；花柱和雄蕊长度等长。新鲜果实呈球形，成熟后为紫黑色，顶部凹陷，种子呈肾形，褐色，内含512颗果籽，510月开花结果。它的果实呈球形，皮熟之后为黑紫色，产量高，没有毒性，果肉里边有大量的花青素，易溶于水，是天然的水溶性花色甙黄酮类。它的口感非常好，比较甜。我们国家是一个拥有枸杞品种比较多的国家。枸杞是一个富含多种营养的宝藏库，而且也是我们国家传统医药食品中的一种中药材，在西方国家它被人们誉为“薄叶西方雪果（Wolfberry)”[4]。
枸杞喜冷凉的气候，比较耐寒和耐旱，对土壤的要求比较低，生命力非常顽强，耐肥，耐盐碱，耐旱，怕水渍。在土质好，日光充足，干燥，温差大等条件下，产量更大，而且品质也比较好。分布在我国的河南、河北、陕西、宁夏、甘肃、青海等地，其中在国外也有分布，比如欧洲，中亚等。其中黑果枸杞在我国宁夏、新疆、内蒙、甘肃、西藏等地区均有生长，是西北部专有的沙漠药用植物品种[5]。
1.1.2 黑果枸杞的实用价值
(1)保健作用
黑果枸杞含有非常多的花青素和维生素C，其含量和功效是普通水果和食品的几十倍，对于缺乏维生素的机体能有很好地补充；也是目前自然界最有效的抗氧化物，有效的防止紫外线对皮肤的伤害，淡化黑色素沉淀，防止皱纹的生成，使皮肤更加光滑，治疗肾精亏损之精少症状；调节代谢，改善睡眠，减少疾病的发生，有助于身体健康。可以安神，改善睡眠及血液循环，使血管更具弹力，增强身体素质[6]。黑果枸杞还是天然的微量元素补给品，如镍、铬、钴等[7]。
(2)环保作用
因为黑果枸杞是分枝较多的小灌木，生长的密集，根与根都连在一块，而且根系也比较发达，所以它的树根能够很好地固定土壤，防止水土流失，还有山体滑坡；固定沙土，防止类似沙尘暴之类的天气，也是一种绿化种植。
(3)药用价值
枸杞是中国传统的滋补性中药，其味甘、性平，富含蛋白质、脂肪、糖类、生物碱等物质。黑果枸杞它具有缓解过敏性炎症、增强人体的造血功能、缓解慢性肝炎和肝硬化、预防白血球减少。在大量的医学研究和临床中证实，黑果枸杞还有强身、提高男性的性功能、降三高（高血糖、高血脂、高血压）、促进免疫功能、养肝明目的药理作用。其中降血糖作用是从汪建红等研究者在2009年通过黑果枸杞多糖提取液给小鼠灌胃，研究不同浓度黑果枸杞多糖对预防和治疗作用糖尿病有没有效果的实验中发现的。经过大量实验得到证实,患有糖尿病小鼠的血糖含量和MDA含量能显著被黑果枸杞多糖降低并取得很好的疗效,而且糖尿病小鼠血清和肝脏的SOD活性也显著增强，但效果低于二甲双胍。SOD是机体清除氧自由基的一种重要的活性酶，其数值越高，直接代表抗氧化能力越强；MDA能够间接发挥抗氧化能力，二者通过减少自由基对胰岛B细胞的损伤，从而保护胰岛B细胞，能够有效降低血糖。病理形态学检查发现，花色苷能有效对atherosclerosis（AS）形成进行干预，同时能够减小atherosclerosis（AS）形成进行干预。不同浓度的花色苷能降低氧化低密度脂蛋白对血管内皮细胞的损伤。所以说它还有预防心血管疾病的作用。《晶珠本草》和《四部医典》等藏药中都记载着黑果枸杞用于治疗心受邪热所致的疾病、心病、月不调、停经、降压等，且有明显作用[8,9]。。
(4)食用价值
黑果枸杞呈深黑色，富含大量的糖，味道偏甜，同时还含有花青素、游离氨酸、微元素（如：钙、镁等）、生物碱、维素、矿质等[10]。在生活中可以用来泡水、煮粥、煲汤，做面食。但是要注意它的温身效果比较好，所以当在发烧和有炎症、腹泻的时候尽量别吃。
1.1.3 国内外关于该论题的研究和发展现状
近年来国内外对枸杞多糖的研究越来越多，因为枸杞多糖有比较多的药理作用，对人们的生活和健康有着很大的影响，吸引更多的人去深入研究它的成分和作用，呈逐年上升的趋势，具有很好地发展前景。国内学者在黑果枸杞临床疗效、有效成分（如矿物质）提取鉴定、药理作用及植物资源等方面作了大量的研究而且比较深入[11]。它的成熟浆果中含有大量的活性多糖成分，研究发现多糖具有抗瘤、抗毒、增强免疫力、延缓衰老、降脂等功效，没有毒性成分，安全且具有一定的营养和良好的药理作用[12,13]，需要人们不断地进行研究和开发，造福人类社会。

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