脂肪干细胞是一类有多种分化潜能的细胞，在治疗损伤修复中有很好的效果。本实验设立空白对照组（A组）、阳性对照组（B组）、普通治疗组（C组）、干细胞治疗组（D组）。对B、C、D组犬腹腔注射50 %四氯化碳油溶液，建立肝损伤模型。经数天连续监测，犬血液中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALKP）浓度显著升高，超过正常值数倍,与A组间差异极显著（P<0.01），判断肝损伤模型建立成功。C组用保肝药物治疗，D组进行干细胞注射，两组各项指标有所下降，说明干细胞与保肝药物均有疗效。对比分析后，发现D组康复时间短，效果好。证明脂肪干细胞在治疗犬的肝脏损伤中确有作用，且效果显著优于一般药物疗法。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
1.1 材料 2
1.1.1 实验动物2
1.1.2 主要试剂2
1.1.3 主要仪器2
1.2 方法 3
1.2.1 实验动物的分组2
1.2.2 四氯化碳肝损伤模型的建立2
1.2.3 干细胞的复苏及针剂制作3
1.2.4分组治疗3
1.2.5 样品收集与处理3
2 结果与分析3
2.1 犬的四氯化碳肝损伤模型的建立3
2.1.1一般体征 3
2.1.2 丙氨酸氨基转移酶（ALT）变化4
2.1.3 天冬氨酸氨基转移酶（AST）变化5
2.1.4 碱性磷酸酶（ALKP）变化5
2.1.5血常规结果6
2.1.7分析7
2.2 犬肝损伤治疗7
2.2.1一般体征 7
2.2.2 丙氨酸氨基转移酶（ALT）变化7
2.2.3 天冬氨酸氨基转移酶（AST）变化8
2.2.4 碱性磷酸酶（ALKP）变化9
2.2.5血常规结果10
2.2.6 X光检查结果10
3 讨论 11
3.1 四氯化碳对犬的损伤 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072# 
11
3.2 脂肪干细胞治疗犬肝损伤的疗效 12
3.3 脂肪干细胞的应用前景12
致谢12
参考文献13
脂肪干细胞在治疗犬的肝损伤中的研究
引言
引言 肝脏是动物体内十分重要的代谢器官和消化器官，肝的主要功能是分泌胆汁，同时具有解毒、防御、物质代谢、造血、贮血等作用。胃肠道吸收的物质经门静脉进入肝内，其中的营养物质被分解利用，供给营养；有毒物质被肝细胞分解或结合转化为毒性较小或无毒物质，与代谢产物一起排出体外,对于机体来说，肝脏的解毒功能十分重要。临床常见的各类型疾病的发生，均伴有不同程度的肝损伤，所以在动物疾病的预防和治疗中，保肝尤为重要。目前临床治疗肝病一般采用口服保肝药物配合补液治疗，疗程长，效果差，需要探寻一种新型方法，干细胞疗法就是一种很好的治疗方式[1]。
脂肪干细胞（adipose stem cells，ADSCs），来源于脂肪组织，目前用于临床实验的脂肪组织主要通过抽脂手术获得[2]。大量研究己经证实ADSCs移植入肝损伤的动物体内，具有改善肝功能、减轻肝脏病理损伤、减轻肝纤维化程度等治疗作用[3][4]。其治疗作用主要通过几个方面实现[5]：提高肝细胞存活率、促进再生、减少凋亡；免疫调节与抑制肝内炎症反应，减少氧化应激；抗纤维化作用；分化为肝细胞，补充肝细胞数量。
汤妍的研究中提到[1]，除了取材和注射过程中的疼痛外，ADSC几乎没有与治疗相关的副作用。目前干细胞疗法最大的隐患就是成瘾作用，然而目前未出现任何一例，这说明ADSCs的治疗风险极小。目前，ADSCs的治疗作用，仅在少数报道中见到，临床材料并不丰富，也还存在着很多不足，因此还需不断探索。本实验采用犬作为动物模型，通过建立肝损伤模型后进行分组，旨在探索ADSCs用于治疗犬的肝脏损伤是否可行有效，以及干细胞疗法是否显著优于普通药物治疗，为进一步临床研究打下基础。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．2 主要试剂
四氯化碳（分析纯 AR），天津市大茂化学试剂厂；
通用组织固定液（中性），武汉塞维尔生物科技有限公司；
天冬氨酸氨基转移酶（AST）试剂盒，爱德士生物科技公司；
丙氨酸氨基转移酶（ALT）试剂盒，爱德士生物科技公司；
碱性磷酸酶（ALKP）试剂盒，爱德士生物科技公司；
C100202P3犬脂肪干细胞，深圳威胜医疗技术有限公司；
一次性使用静脉采血针，山东奥塞特医疗器械有限公司；
一次性使用静脉血样采集容器（无添加剂），江苏康捷医疗器械有限公司；
一次性使用静脉血样采集容器（EDTA抗凝），江苏康捷医疗器械有限公司。
1．1．3 主要仪器
CARESTREAM Vita XE CR，锐珂有限公司；
VetTest干式生化分析仪，爱德士生物科技公司；
血常规分析仪,爱德士生物科技公司。
1．1．1 实验动物
选取健康成年犬12只，雌雄不限，每只体重在610 kg之间。
1．2 方法
1．2．1 试验动物的分组
选取健康成年犬12只，雌雄不限，年龄在12岁之间，体重在610 kg之间，分为空白对照组（A组）、阳性对照组（B组）、普通治疗组（C组）、干细胞治疗组（D组）每组三只。笼养，每日定时牵遛、喂食，自由饮水，观察一周，精神状态、饮食状态、血常规、生化指标均正常，可以进行实验。
1．2．2 四氯化碳肝损伤模型的建造
将四氯化碳与植物油按体积比1：1的比例混合，制成50% 四氯化碳油溶液。在第5天，对B、C、D三组犬，按0.3 mg/kg体重的剂量进行腹腔注射。
1．2．3 犬的脂肪干细胞复苏与针剂制作
离心管中加入10 mL培养基，取出2管冻存的细胞，室温融解至变成小块。每支冻存管中加入1 mL培养基，冲洗细胞至离心管，用冷冻离心机4℃离心5min（400g）。离心后弃上清，加1 mL PBS重悬。取10 μL细胞悬液至EP管，再加入40 μL PBS与50 μL台盼蓝，混匀后计数。离心管中的细胞悬液再次4 ℃离心5 min，弃上清。加1 mL 0.9% 氯化钠注射液于离心管，重悬后吸入针管内。再取0.5 mL 0.9% 氯化钠注射液，冲洗离心管壁，将液体并入针管内。弹去气泡，制成干细胞注射针剂。

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