：根瘤菌与豆科植物共生结瘤可以将空气中的N2还原成可被植物利用的氨，同时植物给根瘤菌提供碳源和其它营养物质，通过微生物固定的氮量约占全球植物需氮量的3/4。谷氧还蛋白（Grxs）是一类重要的抗氧化酶，它与谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶、NADPH组成谷氧还蛋白系统。通过基因比对分析发现，A.caulinodans ORS571中含有四个谷氧还蛋白，依据半胱氨酸活性位点数量可分成两类：单巯基Grx(Grx1,Grx2)和双巯基Grx（Grx3,Grx4)。利用框内敲除的方法构建ORS571谷氧还蛋白的突变株。测定wt和各个突变株的生长曲线表明：Grx突变株（一个Grx缺失）和双巯基Grx（grx3grx4）的生长没有受到影响，单巯基Grx突变株（grx1grx2）和四敲菌株（grx1grx2grx3grx4）生长比wt缓慢。通过测定氧胁迫下的生长曲线并进行杀菌实验、抑菌圈实验发现，单巯基Grx突变株相比于双巯基Grx突变株对过氧化物更敏感，而四敲菌株的敏感性更高。因此可以判定：Grxs在抗氧化中发挥着重要的作用；单巯基Grx的功能不可替代；当过氧化物浓度低时，双巯基Grx功能的缺失可以被单巯基Grx补偿。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 引言 1
1．1 根瘤菌简介 2
1．2 田菁固氮根瘤菌 2
1．3 毛萼田菁 2
1．4 活性氧 2
1．5 谷氧还蛋白 3
2 材料与方法 4
2．1 菌株与质粒 4
2．2 培养基与培养条件 4
2．3 试验的酶和试剂 5
2．4 基本实验方法 5
2．4．1 根瘤菌染色体总DNA的提取 5
2．4．2 二亲接合 5
2．4．3 供试菌株Preinduced cell (pre)的制备 6
2．5 菌株生长曲线的测定 6
2．6 小滤纸片法检测各个突变株的生长 6
2．7 氧化压力下各个突变株生长曲线的测定 6
2．8 杀菌实验 6

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3 结果与分析 7
3．1 A. caulinodans ORS571中的谷氧还蛋白 7
3．2 谷氧还蛋白突变株的获得 7
3．3 谷氧还蛋白缺失株生长曲线 8
3．4 小滤纸片法检测氧化压力下缺失株的生长 9
3．4．1 在过氧化氢条件下的生长 9
3．4．2 在有机氢过氧化物CuOOH压力下的生长 10
3．5 氧化压力下的生长曲线 11
3．6 杀菌实验 13
4 讨论 14
致谢 15
参考文献 15
田菁固氮根瘤菌谷氧还蛋白对其抗氧化能力的影响

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