驱动蛋白超家族（KIFs）是一种沿微管运动的分子马达，将ATP水解释放的化学能转化为沿微管运送货物的动能。KIF14是N型驱动蛋白亚家族成员，其运动结构域表现出微管依赖性ATP酶活性，其异常表达可能会造成细胞分裂中期过渡至后期的延迟，从而抑制细胞质分裂，产生细胞双核状态，但是驱动蛋白KIF14在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用并不清楚。在本次研究中，我们选用6-8周龄雌鼠卵母细胞作为研究对象，使用siRNA来干扰KIF14的表达，并采用免疫印迹、免疫荧光染色、激光共聚焦观察等方法来研究KIF14对小鼠卵母细胞成熟的影响。结果通过免疫荧光发现，KIF14定位于纺锤体区域；注射KIF14 siRNA后，通过蛋白免疫印迹检测到KIF14蛋白表达量显著降低；KIF14敲低后纺锤体组装不受影响，染色体排列异常率显著增高，磷酸化蛋白激酶D表达量显著降低，微管蛋白乙酰化水平显著降低。结论KIF14参与小鼠卵母细胞减数分裂过程中染色体排列和微管的稳定。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 材料与方法 2
1.1 试验材料 2
1.1.1 抗体和化学试剂 2
1.1.2 实验仪器 2
1.1.3 试剂的配置 3
1.2 试验方法 3
1.2.1 卵母细胞的收集和体外培养 3
1.2.2 免疫荧光染色和激光共聚焦分析 3
1.2.3 siRNA注射 3
1.2.4 Western bolt 分析 3
1.2.5 统计分析 4
2 结果与分析 4
2.1 KIF14在小鼠卵母细胞中的定位 4
2.2 KIF14不影响小鼠卵母细胞极体排出 5
2.3 KIF14影响小鼠卵母细胞减数分裂过程中染色体的排列 6
2.4 KIF14影响小鼠卵母细胞减数分裂过程中微管的稳定性 6
3 讨论 7
致谢 8
参考文献 8
驱动蛋白KIF14对小鼠卵母细胞减数分裂的调控作用

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