猪圆环病毒2型（PCV2）在世界范围内广泛流行，给养猪业造成了巨大的经济损失，而PCV2d是近几年PCV2的主要流行基因型之一。本文将一株临床分离的PCV2d毒株接种于无污染的PK15细胞，连续传代培养，用聚合酶链式反应(PCR)、荧光定量PCR的方法检测其连续传代稳定性。结果表明，此株PCV2d毒株可以在PK15细胞上连续传代24代以上，细胞状态正常；PCR检测结果显示，此株PCV2d毒株传代至第24代仍可在带毒细胞中检测到PCV2病毒核酸；荧光定量结果与PCR结果一致。说明此株病毒在PK15细胞上的繁殖能力比较稳定，病毒拷贝数较高，有望作为种子株用于后续疫苗产品的研发。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1材料 4
1.1.1细胞与毒株4
1.1.2阳性对照4
1.1.3主要试剂4
1.1.4主要仪器4
1.1.5 引物合成4
1.2方法 5
1.2.1细胞培养5
1.2.2病毒接种5
1.2.3病毒培养5
1.2.4病毒DNA提取5
1.2.5 PCR检测5
1.2.6荧光定量PCR检测5
2结果与分析6
2.1最佳接毒时间6
2.2 病毒传代过程中细胞形态观察6
2.3 PCR检测胞内病毒6
2.4 荧光定量PCR检测胞内病毒滴度7
3讨论 9
致谢9
参考文献10
猪圆环病毒2d毒株在PK15细胞系中的传代稳定性检测

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