谷氨酸（Glu）是哺乳动物乳汁和幼崽断奶后日粮中的主要氨基酸，在肠道营养物质吸收、细胞信号传导、基因表达调节、抗炎和免疫反应中起到重要作用。研究发现，谷氨酸作为外源信号分子，能够通过激活鲜味受体T1R1/T1R3调节啮齿类动物和人类小肠胆囊收缩素（Cholecystokinin，CCK）的分泌。猪作为另外一种与人类同源性很高的实验动物，其肠道内谷氨酸诱导CCK分泌的机制尚未被研究清楚。所以，本研究建立了体外灌流系统，以猪十二指肠组织为研究对象，探讨谷氨酸调控猪十二指肠CCK分泌的规律和具体机理。结果发现，谷氨酸可以显著促进CCK的分泌（P＜0.05）；IMP作为T1R1/T1R3异二聚体中T1R1的特异性激活剂，可以显著促进谷氨酸引起的CCK分泌（P＜0.05）；而Lactisole是T1R1/T1R3异二聚体中T1R3的特异性抑制剂，它可以显著抑制谷氨酸引起的CCK分泌（P＜0.05）。综上所述，谷氨酸能够促进猪十二指肠CCK的分泌，该促分泌作用可能是通过激活鲜味受体T1R1/T1R3，从而刺激CCK的分泌。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
中英文缩略词对照表2
1引言3
1.1谷氨酸的生理作用3
1.2鲜味受体T1R1/T1R3结构特点及生理作用3
1.3胆囊收缩素（CCK）的生理作用4
1.4目前研究中存在的问题及本研究的目的、意义和主要内容4
1.4.1研究中存在的问题4
1.4.2本研究的目的和意义4
1.4.3研究内容4
1.4.4研究的主要技术路线5
2材料与方法5
2.1表面灌流系统的建立5
2.2试剂和仪器5
2.3试验操作6
2.4样品来源及试验设计6
2.5测定指标及方法6
2.5.1实验原理6
2.5.2试剂准备6
2.5.3详细操作程序7
2.6数据统计与分析7
3结果与分析7
3.1Glu对猪CCK分泌的影响7
3.2鲜味受 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
体T1R1/T1R3激动剂和抑制剂对Glu引起CCK分泌的影响8
4讨论9
致谢9
参考文献10
谷氨酸通过鲜味受体诱导猪十二指肠胆囊收缩素分泌规律的研究
动物科学 胡林桢
引言
中英文缩略词对照表
英文缩写
英文全称
中文全称
EECs
Enteroendocrine cells
肠道内分泌细胞
Glu
Glutamate
谷氨酸
CCK
Cholecystokinin
胆囊收缩素
IMP
Inosine monophosphate
肌苷酸
GMP
Guanosine monophosphate
鸟苷酸
EAAT3
Excitatory amino acid transporter 3
兴奋性氨基酸转运蛋白3
T1R
Taste receptor 1
味觉受体1
mGluRs
Metabotropic glutamate receptors
代谢型谷氨酸受体
CaSR
Calcium sensitive receptor
钙敏感受体
LTrp
Ltryptophan
L色氨酸
MSG
Monosodium glutamate
谷氨酸单钠
Asp
Aspartic acid
天冬氨酸
IP3
Inositol 1,4,5triphosphate
1，4，5三磷酸肌醇
DAG
Diacylglycerol
二酰基甘油
GPCR
G protein coupled receptor
G蛋白偶联受体
mTOR
mammalian target of rapamycin
哺乳动物雷帕霉素受体蛋白
LPhe
Lphenylalanine
L苯丙氨酸
1 引言
蛋白质是维持动物体正常生理功能、发挥生产能力的一种重要营养物质。日常饮食中的蛋白质进入动物胃肠道后，被各种消化酶消化并分解成不同长度的肽和游离氨基酸。氨基酸不但是维持动物生长发育的重要营养素之一，还作为重要的外源信号分子调节动物消化道的多种生理活动，进而影响其他营养素的消化吸收以及胃肠蠕动等生理功能。研究表明，蛋白质水解产物，氨基酸和多肽可调节啮齿动物和人类胃肠内分泌细胞（EECs）中肠道激素的分泌。因此，阐明氨基酸调节胃肠激素分泌的机制有助于阐明动物蛋白质吸收和代谢的机制，为提高日粮中蛋白质利用率提供理论指导，也将为预防和治疗营养代谢疾病方面提供科学依据。
在本研究中，我们以谷氨酸为目标氨基酸，探究其调控猪十二指肠胆囊收缩素分泌的机制，为进一步探索氨基酸，鲜味受体，胃肠激素和动物生理功能之间的联系提供初步的理论依据，为预防和治疗胃肠道代谢和内分泌疾病提供科学依据。
1．1 谷氨酸的生理作用
L谷氨酸（LGlu）是哺乳动物（包括猪和人类婴儿）乳汁和幼崽断奶后饮食中的主要氨基酸[1]。在猪和人的肠细胞中，Glu是一种重要的生物活性分子合成前体，可合成多胺[2]，谷胱甘肽[3]和其它氨基酸[如L脯氨酸[4]，L天冬氨酸[5]和L瓜氨酸[6]]。多胺对DNA和蛋白质合成至关重要，并促进肠上皮细胞沿隐窝绒毛轴的增殖和迁移[7]。所有细胞都需要谷胱甘肽来调节细胞氧化还原状态并发挥其解毒作用[8]。此外，对大鼠和猪的研究表明，Glu是肠细胞的主要代谢燃料，并且在第一次传代期间，96％的肠内Glu在小肠中代谢[913]。Glu还可以激活胃肠道中的化学传感器，导致肠内分泌细胞产生血清素（一种神经递质）[14]。最新研究表明Glu在肠道营养[15]、细胞信号传导、基因表达调节[16]、抗炎反应[17,18]和免疫[19,20]中起重要作用。通过兴奋性氨基酸转运蛋白3（EAAT3）转运Glu是肠细胞利用这种氨基酸的第一步[21,22]。

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