由黏合素介导的姐妹染色单体内聚对于减数分裂过程中染色体的精确分离是必需的。黏合素在染色体上的装载则依赖于另一种称为kollerin的蛋白质复合物，该复合物由Nipbl/Scc2和Mau2/Scc4组成。本实验通过构建Mau2-mRFP融合荧光蛋白发现Mau2主要定位在纺锤体上，而后采用显微注射morpholino来敲低Mau2的蛋白表达量，通过比较正常卵母细胞和敲低后卵母细胞的发育进程，以及染色体、纺锤体、微管的表型来揭示Mau2活性对小鼠卵母细胞减数分裂过程中的重要作用。为后续Mau2的通路研究打下理论基础，同时也为提高卵母细胞减数分裂过程中染色体的精准分离，提高雌性家畜的繁殖力提供理论依据。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1试验材料2
1.1抗体和试剂 2
1.2主要仪器设备 3
1.3抗体和试剂的配制3
2实验方法3
2.1小鼠卵巢RNA提取3
2.2 RNA变性及反转录3
2.3 PCR反应体系和条件4
2.4 PCR产物检测4
2.5质粒的构建5
2.6质粒的体外转录及加尾6
2.7显微注射Mau2 morpholino6
2.8免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜观察6
2.9统计分析7
3结果与分析7
3.1同源重组法载体构建结果7
3.2随着卵母细胞减数分裂时期变化Mau2的定位从胞质逐步转移至纺锤体上7
3.3敲低Mau2影响卵母细胞纺锤体组装和染色体排列8
3.4敲低Mau2影响卵母细胞中微管稳定性10
3.5敲低 Mau2影响卵母细胞体外成熟10
4讨论11
致谢12
参考文献12
附录14
Mau2调控小鼠卵母细胞纺锤体组装的分子机制

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562343.html