环磷酰胺对小鼠附睾结构与功能的影响(附件)【字数：10719】
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1材料与方法2
1.1试验材料2
1.1.1试验药物及试剂2
1.1.2试验动物2
1.1.3试验仪器2
1.2试验方法2
1.2.1小鼠常规观察2
1.2.2小鼠附睾指数测定2
1.2.3小鼠精子密度测定2
1.2.4小鼠精子活率测定 3
1.2.5小鼠精子细胞凋亡测定3 1.2.6小鼠附睾组织形态学观察3 1.2.7小鼠附睾免疫组化染色3
1.2.8统计方法4
2结果与分析4
2.1小鼠常规状态观察结果4
2.1.1小鼠临床表现4 2.1.2小鼠体重变化4
2.2小鼠附睾指数测定结果5
2.3小鼠精子密度测定结果5
2.4小鼠精子活率测定结果5
2.5小鼠精子凋亡率测定结果6
2.6小鼠附睾组织形态学观察结果6
2.7小鼠附睾免疫组化法染色观察结果7
2.7.1小鼠附睾AR表达7
2.7.2小鼠附睾claudin蛋白表达8
2.7.3小鼠附睾CD63的表达8
2.7.4小鼠附睾LGR5的表达8
2.7.5小鼠附睾LYSOZYME的表达9
2 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072*
.7.6小鼠附睾CD68的表达9
3讨论9
3.1小鼠体重及附睾、精子变化10
3.2小鼠附睾切片观察10
3.2.1小鼠附睾免疫组化染色10
致谢11
参考文献12
环磷酰胺对小鼠附睾结构与功能的影响
引言
附睾是附着于睾丸后缘的外包有固有鞘膜和薄的白膜的结构，可分为附睾头、附睾体和附睾尾，附睾头部由睾丸的输出小管和部分附睾管构成，附睾的体部和尾部由另一部分附睾管构成，精子在睾丸的生精小管中形成后，即使形态上已发育成熟，但不具有使卵母细胞受精的能力，需要经直精小管、睾丸网进入附睾，当精子迁移到附睾时，精子头部的染色质浓缩，转录和翻译过程停止，它的成熟和修饰需要雄性配子与附睾中的微环境之间相互作用。精子在附睾中需要转运510天才能获得精子活力、识别卵子和使其受精的能力，所以附睾是保护并储存哺乳动物精子，使其成熟并获得运动能力的重要器官[14]。
环磷酰胺（CP）是一种临床上常用的抗癌药物，其代谢产生的活性烷化化合物如4羟基环磷酰胺、磷酰胺氮芥和丙烯醛，可以抑制DNA、阻止细胞分化并抑制肿瘤细胞生长，因此被广泛用于淋巴瘤，乳腺癌、白血病等癌症的治疗[57]。然而，由于丙烯醛产生的活性氧（ROS）、一氧化氮和过氧亚硝酸可以破坏细胞内的脂质、蛋白质和DNA，会对人体的健康细胞产生毒性作用。环磷酰胺对癌细胞的毒性不是特异性的，它会影响所有的分裂细胞，包括免疫系统、生殖系统和消化系统中的细胞。环磷酰胺能干扰卵巢中的卵母细胞形成和睾丸中的精子分化，并可能导致男性和女性的不育[5] 。本实验旨在将环磷酰胺腹腔注射造炎症动物模型，探讨环磷酰胺对附睾形态结构及功能的影响。
1 材料与方法
1．1 试验材料
1．1．1 试验药物及试剂
注射用环磷酰胺 规格为0.2g，江苏恒瑞医药股份有限公司。功能：致使机体发生精子减少症或无精症，同时伴有不同程度的睾丸萎缩。用法与用量：环磷酰胺200mg/瓶，溶剂配制：在瓶内加入10mL生理盐水配成注射液。
HEPES 南京森贝伽生物科技有限公司
5%BSA封闭液 武汉博士德生物工程有限公司
AR一抗 武汉博士德生物工程有限公司
Claudin一抗 武汉博士德生物工程有限公司
CD63一抗 武汉博士德生物工程有限公司
LGR5一抗 武汉博士德生物工程有限公司
Lysozyme一抗 武汉博士德生物工程有限公司
羊抗兔IgG 武汉博士德工程有限公司
异氟醚、生理盐水、乳酸钠水溶液（1%）、FITC AnnexinⅤ Apoptosis Dectection KitⅠ（BD）、乳酸钠水溶液（1%）、丙酮酸钠、硫酸庆大霉素、酚红、人血清白蛋白、过氧化氢、苏木精、伊红、二甲苯、中性树胶
1．1．2 试验动物
ICR小鼠 SPF级，雄性，8~9周龄，南京江宁区青龙山动物繁殖场提供，饲养于大学动物实验中心。实验动物自由采食（鼠全价颗粒料）和饮水，饲养于清洁、安静的环境中，给予自然光照，环境温度控制在20℃左右。实验前适应性饲养3天，观察其健康状况，选择健康、营养状况良好的进行试验。
1．1．3 试验仪器
小鼠笼4个、水瓶、鼠粮、垫料、电子秤、注射器2mL、200目尼龙网、打耳钳、手术器械、量筒、乳胶手套、烧杯、解剖器械、牛鲍氏细胞计数板、流式细胞仪等。
1．2 试验方法
将20只雄性小鼠，随机分为空白对照组和模型组。模型组连续7d腹腔注射50mg/kg环磷酰胺，空白对照组腹腔注射等量生理盐水。连续观察35d。
1．2．1 小鼠常规观察
原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562284.html
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