猪圆环病毒2型（PCV2）可引起猪圆环病毒相关病，包括断乳仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎肾病综合征（PDNS）、猪呼吸道病、肠炎、母猪繁殖障碍和仔猪先天震颤等，其中以PMWS最为常见。PMWS的发生和流行已经给世界养猪业造成了巨大的经济损失，该病呈世界流行性趋势，在我国的流行也十分广泛。本研究应用PCR方法检测江苏某猪场病料，对阳性病料进行全基因组测序分析，将检测为PCV2的病料无菌处理后接种于无污染的猪肾细胞（PK15），并连续传代培养，对每代收获的病毒培养物提取DNA，用常规PCR方法初步进行定性分析，用荧光定量PCR的方法对病毒拷贝数进行定量分析。常规PCR结果显示病毒在培养P6~P10代后能稳定增殖；荧光定量PCR结果显示P6代后细胞内的病毒拷贝数稳定在105以上。P10代病毒全基因组测序结果与P0代病毒的序列相同，未出现污染和变异。本文所筛选的PCV2毒株能适应体外细胞连续传代培养，为其疫苗研发奠定了基础，具有潜在的应用价值。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言4
1 材料与方法4
材料 4
1.1.1病料4
1.1.2细胞4
1.1.3试剂4
1.1.4仪器4
1.1.5测序4
1.2 方法 5
1.2.1病料处理5
1.2.2 筛选PCV2阳性病料5
1.2.3 PCV2阳性病料全基因组测序分析5
1.2.4 阳性病料无菌处理6
1.2.5 PK15细胞培养6
1.2.6病毒接种6
1.2.7病毒传代6
1.2.8病毒收获6
1.2.9 PCR检测6
1.2.10荧光定量PCR检测6
1.2.11全基因组测序7
2 结果与分析7
2.1 病料PCV2检测7
2.2 PCV2全基因组扩增7
2.3 PCR方法检测病毒培养物8
2.4 荧光定量PCR方法检测PCV2病毒拷贝数8
2.5 全 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: &351916072& 
基因组测序结果10
3 讨论 10
致谢11
参考文献11
猪圆环病毒2型的分离与鉴定

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