从PCV2b阳性病料中，分离出一株PCV2b毒株，在PK-15细胞上连续传10代后，用PCR、荧光定量PCR、全基因组测序方法对分离毒株进行鉴定。结果表明，该毒株可在PK-15细胞上稳定增殖10代以上，不产生细胞病变，基因序列未发生突变；各代次的PCR目的条带亮且均一，初步判定该毒株的细胞适应性好，繁殖能力较强；荧光定量PCR结果表明该毒株每个代次的病毒拷贝数均保持在较高的水平，第2代的病毒拷贝数就可达到1.065×109copies/μL，且随着代次的增加逐渐升高，最高代次第10代的病毒拷贝数为4.762×109copies/μL。后期将进一步通过间接免疫荧光、TCID50测定、动物试验等方法对该毒株进行更为深入的致病机理、生物学特性及免疫原性研究。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言（或绪论）3
1 材料与方法4
1.1 病料来源4
1.2 细胞和主要试剂4
1.3 病毒分离4
1.4 病毒增殖4
1.5 病毒传代4
1.6 病毒DNA提取4
1.7 分离株特异性PCR测定4
1.8 荧光定量PCR检测5
2 结果与分析 5
2.1 病毒分离株的PCR测定 5
2.1.1 样品病毒PCR测定5
2.1.2 病毒分离株的PCR鉴定5
2.2 病毒分离株PCV N1/N2全基因测序6
2.3 病毒分离株荧光定量PCR检测6
3 讨论7
致谢8
参考文献8
猪圆环病毒2b毒株的分离与鉴定

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/562267.html