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h9n2亚型禽流感疫苗株的筛选(附件)【字数:4974】

2024-02-25 11:37编辑: www.jxszl.com景先生毕设
为了解江苏 H9N2亚型禽流感病毒( AIV) 的变异情况,本实验筛选出12株从江苏不同地区分离的H9N2亚型禽流感病毒的毒株,对其进行血凝及血凝抑制试验, 初步筛选出5株血凝价较高的H9N2亚型禽流感病毒株,采用有限稀释克隆法对该5株毒株进行纯化,并对纯化后病毒的HA和NA基因进行了测序分析,为下一步筛选疫苗株奠定基础。结果表明经M229甲型流感通用引物鉴定该12株病毒株均为甲型流感;与H9血清的血凝抑制价分别为29、210、29、27、27;纯化后五个毒株的血凝价分别为210、210、210、210、29;HA的同源性为88.8%-99.7%;NA的同源性为91.8%-99.9%;综合比较结果可知,18092904、18092909可作为疫苗备用株,以进行下一步的动物实验。
目录
摘要 3
关键词 3
Abstract 3
Key words 3
1材料与方法 4
1.1 病毒 4
1.2主要试剂 5
1.3 M229甲型流感通用引物鉴定 5
1.4血清学鉴定 5
1.4.1 制备1%鸡红细胞 5
1.4.2 HA检测抗原血凝价 5
1.4.3 4HA100U抗原的配制及调整 5
1.4.3.1 4HA100U抗原的配制 5
1.4.3.2 4HA100U抗原的检验(回归) 5
1.4.3.3 4HA100U抗原的调整 6
1.4.3 HI试验 6
1.5 病毒的纯化 6
1.6 提取病毒RNA与反转录 6
1.7扩增目的片段及测序 6
1.8 HA、NA 基因的序列分析 7
2 结果与分析 8
2.1引物鉴定的结果 8
2.2血清学鉴定的结果 9
2.3扩增及测序结果 10
2.3.1HA基因同源性及进化树分析 10
2.3.2 NA基因同源性及进化树分析 12
致谢 14
参考文献 14
H9N2亚型禽流感疫苗株的筛选

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