摘 要摘 要邻苯二甲酸酯类是人类生活中应用最广泛的增塑剂，同时又是对水体造成污染的内分泌干扰物，具有遗传毒性，可使动植物发生病变。三角褐指藻是一种海洋单细胞藻类，是食物链最底端的初级生产者，具有培养周期短，个体小等特点，有利于实验室培养和研究。本实验设计和测量不同浓度梯度的邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二乙酯对三角褐指藻的毒性效应。试验通过对三角褐指藻的培养，接种培养后，将邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二乙酯设置成0、50、100、200、400 mg/L，以及将邻苯二甲酸二甲酯与邻苯二甲酸二乙酯按2000、20050、200100、200200、200400 mg/L的浓度梯度进行毒性试验，设置三个平行组，每隔24 h进行OD625、OD645、OD663的数据采集；持续96 h后，进行细胞破碎，利用试剂盒测量SOD、POD、MDA以及总蛋白含量。通过与对照组比较，实验结果表明邻苯二甲酸二甲酯二甲酯在50、100、200、400 mg/L的抑制率分别为9.5%、22.7%、35.2%和72.7%；邻苯二甲酸二乙酯在50、100、200、400 mg/L浓度是的抑制率分别为25.4%、80.5%、103.4%、121.3%；所设置按比例耦合浓度的抑对藻体的抑制率分别为54.5%、80.3%、103.2%、126.1%。得出结论随着邻苯二甲酸二甲酯和邻苯二甲酸二乙酯的浓度不断升高，对藻体的毒性作用越来越大，邻苯二甲酸二乙酯比邻苯二甲酸二甲酯对三角褐指藻的毒性更大，两者耦合后的抑制能力更强。通过分析破碎细胞后对三角褐指藻各项指标的测量结果，发现邻苯二甲酸酯类影响三角褐指藻的正常生命活动，随着浓度增高，藻体内氧自由基不断增多，细胞破损情况越来越严重，邻苯二甲酸酯类物质浓度过高时，藻体会直接死亡。关键字邻苯二甲酸二甲酯；邻苯二甲酸二乙酯；三角褐指藻；毒性作用
目 录
第一章 绪论 1
1.1 邻苯二甲酸酯类的简介 1
1.2 邻苯二甲酸酯类的应用 1
1.3 邻苯二甲酸酯类的毒性 2
1.4 邻苯二甲酸酯类在环境中主要来源 3
1.5 邻苯二甲酸酯类的研究进展 3
1.6 邻苯二甲酸酯类的研究背景和意义 4
1.7 三角褐指藻简介 4

 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
1.8 DMP和DEP简介和污染现状 5
1.9 主要研究内容 5
第二章 材料与方法 6
2.1 实验材料及设备 6
2.1.1 实验植物材料 6
2.1.2 实验主要仪器 6
2.1.3 主要试剂 6
2.2 试剂的制备 7
2.2.1 实验前的准备 7
2.2.2 邻苯二甲酸酯类物质的制备 7
2.2.3 试剂的具体配置比例 7
2.3 三角褐指藻培养方法 8
2.4 实验方案 9
2.4.1 96小时前的数据测量以及测量方法 9
2.4.2 96小时后的数据测量以及测量方法 9
2.4.2.1 蛋白定量(BCA法)测试盒测量蛋白浓度 9
2.4.2.2 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒测量SOD活力 10
2.4.2.3 过氧化物酶(POD)测试盒测POD活力 11
2.4.2.4 丙二醛(MDA)测试盒测量MDA含量 12
2.5 具体操作 13
第三章 结果与分析 15
3.1 邻苯二甲酸二甲酯对三角褐指藻的毒性效应 15
3.1.1 邻苯二甲酸二甲酯实验总结 21
3.2 邻苯二甲酸二乙酯对三角褐指藻的毒性效应 21
3.2.1 邻苯二甲酸二乙酯实验总结 27
3.3 邻苯二甲酸二甲酯与邻苯二甲酸二乙酯耦合试验 27
结论 35
致谢 37
参考文献 38
第一章 绪论
1.1 邻苯二甲酸酯类的简介
邻苯二甲酸酯类（phthalic acid esters）简称酞酸酯，有14个种类且广泛应用于加工合成，其中包含邻苯二甲酸二甲酯，邻苯二甲酸二正丁酯，邻苯二甲酸二辛酯等，是有机化合物，无色黏稠液体。具有良好的熔融性，可形成高弹性的化合物。易溶于大多数的有机溶剂，易凝固，有特殊的气味，不易挥发，燃烧性不强，近似于水的比重。在一定温度范围内，随着分子质量加大挥发性会增大，水的溶解能力也会降低[1]。PAEs通过氢键和范德华力与产品间连接，其化学性质具有相对独立性。邻苯二甲酸酯类物质可以在水体中发生水解、光化学反应等一系列作用[2]。
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图11 邻苯二甲酸酯类的化学结构式
Fig. 11 Chemical structural formula of phthalic acid ester
1.2 邻苯二甲酸酯类的应用
PAEs在50多年前就被用作塑料增塑剂，根据有关机构统计，每年将近600万吨的塑料类产品被人类生活所消耗掉[3]，PAEs的塑料产品又是在其中分布及其广泛，在性能优越的塑料中，PAEs的成分所占比重近88%。PAEs主要广泛应用于颜料、农药载体、润滑剂、地板、化妆品、雨衣、服装、建筑材料、杀虫剂、包装材料、各种复合物以及注射器和储血袋等。
表11 邻苯二甲酸酯类化合物的名称和应用
Table 11 Names and usage of PAEs
邻苯二甲酸酯类名称
英文名称
应用领域
邻苯二甲酸二甲酯
DMP
塑料增塑剂
邻苯二甲酸二乙酯
DEP
塑料增塑剂
邻苯二甲酸二己酯
DHxP
塑料增塑剂
邻苯二甲酸二环己酯
DCHP
丙烯酸稀释剂
邻苯二甲酸二壬酯
DINP
塑料增塑剂
邻苯二甲酸二丁酯
DIBP
粘合剂、增塑剂、玻璃
邻苯二甲酸－n－己酯
DHP
塑料增塑剂
邻苯二甲酸二戊酯
DpeP
塑料增塑剂
二（2乙基己基）邻苯二甲酸酯
DEHP
氯乙烯、增塑剂
1.3邻苯二甲酸酯类的毒性
由于国家已经意识到必须要严格控制PAEs的污染，我国在2008年开始施行“限塑令”。。PAEs对动物有致畸、致癌 和致突变的危害[45]。PAEs也可以对动物的生殖产生不利影响[67]，大多难以生物降解。PAEs含有雌激素，人们每天生活在其环境下[8]。以及PAEs是一类重要的机体内分泌干扰物,同时内分泌干扰物可以对水体造成严重的污染，脂溶性比较高，具有类激素功能，在生物体内产生成分累积，严重影响人类以及各种生物的健康状态。酞酸酯类化合物具有遗传毒性[9]，能影响动物酸性和碱性磷酸酶活性[10]及抗氧化性能[11]。
DMP、邻苯二甲酸丁基苄基酯、邻苯二甲酸二正辛酯、邻苯二甲酸(2一乙基己基酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二乙酯等6种PAEs已被美国国家环保局列入污染物优先控制的名单[12]，相关机构研究表明，越发达国家的人民接触PAEs的机会和接触程度越大[13]。

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