摘 要摘 要丝胶蛋白是构成蚕丝的两种主要蛋白（丝胶和丝素）之一，具有良好的生物活性和低免疫原性，已成为组织工程领域备受青睐的新兴生物材料。2014年我们采用未降解性丝胶在国际上首次通过交联的方式制备了具有优良特性的三维纯丝胶蛋白水凝胶，但在机械强度、荧光特性等方面仍需进一步改善，另一方面，丝胶蛋白在组织工程材料的研究中处于起步阶段，尚未有多重交联丝胶蛋白材料的研究报道，因此，多重交联丝胶蛋白的研究十分必要。本课题拟同时采用戊二醛（与氨基发生交联反应）和过氧化氢/辣根过氧化物酶（与酚羟基发生交联反应）作为交联剂交联丝胶制备丝胶蛋白水凝胶。并对丝胶蛋白水凝胶的理化性质进行系统地表征，结果表明，多重交联的丝胶蛋白水凝胶较之单交联水凝胶具有以下特点1）多重交联水凝胶较之单交联水凝胶在绿色荧光和红色荧光的荧光强度显著增强 ；2）水凝胶的孔隙率有所下降，但仍保持较高的孔隙率，亦十分适合细胞组织培养。关键词 丝胶蛋白；戊二醛；过氧化氢；多重交联；荧光
目 录
第一章 综 述 1
1.1 组织工程 1
1.1.1 组织工程简介 1
1.1.2 组织工程基本原理 1
1.2 生物支架 1
1.2.1 生物支架的性质 1
1.2.2 生物支架的应用现状 1
1.3 丝胶蛋白 2
1.3.1 丝胶蛋白的研究现状 2
1.3.2 丝胶蛋白的结构与特性 2
1.3.3 丝胶蛋白的分离 4
1.3.4 丝胶蛋白的生物活性 5
1.3.5 丝胶蛋白的应用 5
1.4 水凝胶 7
1.4.1 水凝胶的分类 7
1.4.2 水凝胶的性质 8
1.4.3 水凝胶的制备方法 8
1.4.4 水凝胶的应用 9
第二章 实验内容 11
2.1 实验材料 11
2.2 实验仪器 11
2.3 实验方法 12
2.3.1 丝胶蛋白的提取（溴化锂LiBr法） 12
2.3.2 透析袋的预处理 13
2.3.3 丝胶蛋白水凝胶的制备 13
2.3
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
.4 丝胶蛋白水凝胶冻干支架的制备 14
2.3.5 0.01M PBS溶液的制备 14
2.3.6 丝胶蛋白微观结构观察 14
2.3.7 丝胶蛋白水凝胶孔隙率的测定 14
2.3.8 丝胶蛋白水凝胶的吸水性测定 15
2.3.9 丝胶蛋白水凝胶的膨胀动力学分析 15
2.3.10 丝胶蛋白水凝胶的降解动力学分析 15
2.3.10 丝胶蛋白水凝胶的傅立叶转换红外分析 16
2.3.11 丝胶蛋白水凝胶的荧光性质测定 16
第三章 实验结果与讨论 17
3.1 不同交联方式制备的丝胶蛋白水凝胶 17
3.2 丝胶蛋白水凝胶多孔的微观结构 17
3.3 丝胶蛋白水凝胶的FTIR分析 19
3.4 丝胶蛋白的吸水性测试 20
3.7 丝胶蛋白水凝胶的膨胀动力学 21
3.8 丝胶蛋白水凝胶的荧光特性 23
实验结论 26
致谢 27
参考文献 28
 综 述
1.1 组织工程
1.1.1 组织工程简介
组织工程是将细胞生物学、材料科学等工程科学和生命科学等学科的基本原理和方法相结合，进而进行体内或体外组织、器官构建的新型学科，同时也是20世纪80年代兴起的一门新型交叉学科。
1.1.2 组织工程基本原理
从机体获取少量活体组织，将种子细胞从组织中分离出后在体外进行细胞的扩增培养，再将其与生物相容性良好的生物材料（生物支架）按照一定比例混合，使细胞依附于支架上，再将该复合物植入受体的特定部位，在生物材料降解的过程中，依附于其上的细胞不断增殖，最终形成目标组织，从而实现对受损组织的修复与重建。在这一过程的关键在于用于细胞组织培养的生物支架材料的选用。
1.2 生物支架
1.2.1 生物支架的性质
支架材料是组织工程与临床应用的关键。作为细胞培养的微环境，生物支架不仅可以支撑和依附细胞，也为细胞和环境之间的营养和代谢产物的交换提供了适宜的场所。在组织工程中选择优先选择无毒性，具有良好的生物相容性，无排异反应等生物活性的生物支架；一定的孔隙率、优秀的机械强度和良好的表面活性等理化性质，有利于维持依附于其上的细胞的形态并促进其生长；良好的生物相容性和细胞亲和性可以促进细胞增殖，诱导组织再生。
1.2.2 生物支架的应用现状
目前为止，一些天然高分子材料（甲壳素，壳聚糖海藻酸盐、胶原蛋白、明胶、琼脂等）、天然无机材料（珊瑚礁、纤维蛋白等）和合成高分子材料（脂肪族聚酯、聚酸酐、聚醚、聚丁酸等）等生物材料已被应用于组织工程中作为细胞支架。
天然生物材料的生物相容性好，与细胞外基质拥有相似的结构，有利于细胞的黏附和增殖，因此天然生物材料是组织工程材料研究的热点内容。随着研究的深入，丝胶蛋白也逐渐进入人们的视线，其所具有的优良的生物活性也被陆续发现。丝胶蛋白生物相容性好，细胞亲和性高，资源丰富，来源广泛。因此，对丝胶蛋白的研究和利用丝胶蛋白为材料制作生物支架对组织工程的研究有着十分重要的意义和广阔的应用前景。
1.3 丝胶蛋白
1.3.1 丝胶蛋白的研究现状

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