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拟南芥dna去甲基化突变体p277的筛选与鉴定

2021-05-29 23:18编辑: www.jxszl.com景先生毕设
大量研究表明,DNA甲基化能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。在植物体内存在着一套维持DNA分子甲基化水平的机制,以保障植物正常生长和发育,对维持植物的正常生长和生理活动有着重要作用。DNA甲基化作用是维持基因组甲基化水平的重要因素,而DNA去甲基化作用可拮抗过度的DNA甲基化或去除异常的DNA甲基化模式,对解除转录基因沉默,激活基因重新表达有重要作用。在植物中DNA主动去甲基化过程是通过ROS1家族介导的碱基切除修复机制来实现的。本文主要通过Col-LUC系统和拟南芥植物,以Col-LUC为亲本材料进行EMS诱变,在后代中筛选获得荧光降低的突变体P277,之后进行图位克隆、分子学和遗传学实验,来确定基因位置,实验最终将P277定位在2号染色体上,在分别位于F26B6与T20P8两个细菌人工染色体上的两个分子标记之间。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1实验材料 3
1.1.1 植物材料 3
1.1.2 培养土4
1.1.3 1/2MS培养基4
1.2 实验方法4
1.2.1 诱变准备4
1.2.2 种子转移与培养4
1.2.3 荧光筛选4
1.2.4 突变鉴定 4
1.2.5 显隐性判断5
1.2.6 定位5
1.2.7 甲基化分析5
2 结果与分析5
2.1低荧光突变体荧光表现5
2.3 显隐性检测分析 5
2.4 图位克隆结果6
2.5 ChopPCR8
3 讨论9
致谢9
参考文献9
拟南芥DNA去甲基化突变体P277的筛选、鉴定

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