蜻蜓目是最常见的一类水生昆虫，其中差翅亚目所占比例较大，分布较广，是比较重要的一个类群。我国对于差翅亚目成虫的研究已较为完善和成熟，但对稚虫的分类研究、成幼虫联系、系统发育等方面的研究存在较大的不足。本文主要以长三角地区的溪流或池塘等水体的蜻蜓目差翅亚目稚虫为研究对象，通过野外采集和人工饲养进行标本收集，利用传统形态分类学方法和分子生物学手段确定差翅亚目最终的物种。本研究重新描述了2科5种的差翅亚目蜻科和春蜓科稚虫，包括锥腹蜻Acisoma panorpoides Rambur、黄翅蜻Brachythemis contaminata Fabricius、环纹环尾春蜓Lamelligomphus ringens Needham、鼎异色灰蜻Orthetrum triangulare Selys和大团扇春蜓Sinictinogomphus clavatus Fabricius，研究结果表明发现前颏、上颚、肛附器等特征对差翅亚目鉴定有着重要意义，传统形态分类学和分子生物学方法的分类结果一致性较高。本文结果对今后长三角地区差翅亚目稚虫鉴定和分类的工作提供了技术支持和数据积累。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法3
1.1 研究标本 3
1.2 稚虫的采集与标本保存3
1.3 实验室稚虫饲养4
1.4 标本观察与初步鉴定4
1.5 DNA序列的获取与处理4
1.5.1 DNA提取4
1.5.2 PCR扩增4
1.5.3 序列编辑与构建系统发育树5
1.6 标本描述与拍照5
2 结果与分析 5
2.1 锥腹蜻 Acisoma panorpoides（Rambur, 1842）6
2.2 黄翅蜻 Brachythemis contaminata（Fabricius, 1793）7
2.3 环纹环尾春蜓 Lamelligomphus ringens（Needham, 1930）9
2.4 鼎异色灰蜻 Orthetrum *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
triangulare (Selys, 1878)11
2.5 大团扇春蜓 Sinictinogomphus clavatus（Fabricius, 75）13
3 讨论15
致谢15
参考文献16
附录18
长三角地区蜻蜓目差翅亚目蜻科和春蜓科稚虫分类研究
引言
蜻蜓目是昆虫纲最古老的类群之一，可分为均翅亚目（Zygoptera）、间翅亚目（Anisozygoptera）和差翅亚目（Anisoptera）[1]共三个亚目；其中差翅亚目种类所占比例较大，分布较广，是蜻蜓目较重要的一个类群。蜻蜓目稚虫广泛分布于淡水水域的各种生境，不仅可以作为指示生物监测水环境质量，而且可以在蜻蜓目分类研究中弥补单靠成虫形态特征鉴定的不足，为蜻蜓目乃至昆虫纲的系统发育和进化研究提供有力的形态学证据。
我国的蜻蜓分类研究可以追溯到1930至1931年，Needham[23]在《A Manual of the Dragonflies of China》及其增订版中共记录了我国蜻蜓目283种。隋敬之和孙洪国[4]在1986年所著的《中国习见蜻蜓》一书中，以中国科学院动物研究所当时收藏的我国蜻蜓标本为基础，共记述了15科89属208种蜻蜓，其中差翅亚目6科51属108种，并详细记述了形态特征，编写了种级分类的检索表。赵修复[5]于1990年《中国春蜓分类》中，以传统分类特征为基础，提出采用雄性交合器各部分详细构造和雌性腹部第79节腹板等作为新型分类特征，整理并综合我国22属145种春蜓科，以此为基础提出新的分类系统，并沿用至今。朱慧倩等[6]、徐奇涵等[7]、周文豹等[8]随后记述了我国春蜓新种，对春蜓科分类作出了贡献。王治国[910]在2007年和2017年分别发表《中国蜻蜓名录》和 《中国蜻蜓分类名录》，首次总结前人文献，将中国蜻蜓种类汇集一表；并增订了中国蜻蜓目全部三个亚目的种类与分布。近年来，我国部分地区相继开展蜻蜓目昆虫的调查研究，虞蔚岩等[11]在《江苏蜻蜓区系及多样性》记录了江苏地区蜻蜓目差翅亚目6科24属32种；张宏杰等[12]、杨国辉等[13]、李秋剑等[14]、赵红蕊等[15]分别对陕西、云南、澳门、吉林的蜻蜓目昆虫资源进行了概述。据统计，我国蜻蜓目共计3亚目20科159属730余种[10]，其中差翅亚目7科96属[16]。尽管我国蜻蜓目差翅亚目的分类研究已经有了极大发展，在部分地区不断发现新属、新种和新记录种，但在蜻蜓目稚虫分类研究、稚虫的描述、成幼虫联系、系统发育等方面的研究依旧不足。
我国最早对蜻蜓目稚虫的分类研究相对较少，相关资料也相当缺乏；已有出版物对蜻蜓目稚虫的形态未做描述或仅有部分描述。如1930年，Needham[23]虽然通过图版对7个科的蜻蜓稚虫形态做了简要的图示，但未作详细描述。20世纪80年代起，我国关于蜻蜓稚虫的分类研究逐步增加。赵修复于1987年通过对稚虫的培养从而建立了新属，对新种稚虫也做出了描述[17]；1990年赵修复出版《中国春蜓分类》[5]一书，描述了部分差翅亚目春蜓科稚虫的形态特征，后于1995年编写福建省蜻蜓目稚虫分属检索表[18]；江尧桦[19]1996年针对蜻蜓稚虫的雌雄特征描述、鉴别了6种蜻蜓和豆娘的稚虫；Xu于2010年[20]描述了我国福建地区2种弓蜻属（Macromia）稚虫；近几年，Zhang和Tong[2123]对华南和西南地区蜻蜓目蜓科（Aeshnidae）、春蜓科（Gomphidae）和大蜓科（Cordulegastridae）的数种差翅亚目稚虫的分类特征进行了详细描述。张浩淼[24]对蜓科、春蜓科、大蜓科、伪蜻科的多个种的稚虫进行了详细的描述。
传统昆虫分类学和系统发育研究主要依赖物种的形态解剖特征、生物学性状和生物地理学信息等，但如虫体龄期过小、分类特征分化不明显、保存时间过长引起标本毁坏等问题，导致利用传统分类学方法进行研究存在一定的局限性。生物科学及其相关学科技术的发展，为解决这些问题提供了可能的解决办法。Artiss等[25]用线粒体16S RNA和CO Ⅰ基因序列对差翅亚目蜻科（Libellulidae）3个属的从属关系进行了研究；Misof等[26]应用16S和12S rDNA对差翅亚目内部系统发育进行了研究。查岭生等[27]通过设计蜻蜓目CO II全基因的非特异性引物，获得蜻科5亚科15属21种蜻蜓的21条CO II基因全序列。张大治[2830]等通过PCR及PCR产物的直接测序技术，测定了差翅亚目蜻科的多个属、种的线粒体DNA细胞色素b基因的部分核苷酸序列（长度约为576bp），探讨了蜻亚科多属的亲缘关系以及系统发育关系。近年来，国内外许多学者还利用DNA条形码技术成功联系蜻蜓稚虫及成虫，并明确物种。如Albert[31]在2015年通过邻接法构建关于CO I基因的系统发育树，确定并描述Drepanosticta；Philip[32]在2016年也利用邻接法构建关于CO I的系统发育树，确定并描述Orthetrum borneense；Yu[33]在2016年同样利用邻接法构建关于COI的系统发育树，确定并描述Mesopodagrion tibetanum australe。由此可见，PCR技术和DNA序列测定分析技术在蜻蜓目分类研究中拥有巨大的可行性，为稚虫分类研究提供了新的方向，通过分子测序方法得到稚虫的DNA序列，在基因库中或与成虫进行比对，为鉴定带来了更大的准确性与便利性。

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