番茄、烟草等茄科植物细菌型青枯病的防治是世界性的难题，传统的物理、化学方法都不能有效地控制该病害。“噬菌体疗法”、“生防菌疗法”是近年来对抗青枯菌的新方法。本研究从青枯病发病土壤中分离得到了青枯菌的噬菌体。但用同样的方法未能从全国192个地区的土壤样品中分离出生防菌解淀粉芽孢杆菌T-5的噬菌体。猜测是由于噬菌体专一性较强，只能从宿主菌所在环境中分离得到相应的噬菌体。因而从南农校园采集土壤，分离得到一株芽孢杆菌YKM-1，但未能从土壤中分离得到其噬菌体。猜测可能由于芽孢杆菌自身的性质，需要从特定的环境进行分离。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1材料与方法2
1.1试验材料 2
1.1.1菌株和土样 2
1.1.2主要试剂2
1.2 试验方法4
1.2.1 青枯菌噬菌体的分离4
1.2.2 T5噬菌体的分离 4
1.2.3 芽孢杆菌的分离与纯化 4
1.2.4 芽孢杆菌的鉴定 5
2结果与分析5
2.1 青枯菌噬菌体的分离 5
2.2 T5噬菌体的分离 5
2.3 原位芽孢杆菌的分离 6
2.4芽孢杆菌的16S rRNA鉴定 6
2.5 原位芽孢杆菌噬菌体的分离 7
3讨论7
致谢8
参考文献8
根际有益菌专一噬菌体的筛选与鉴定 
引言
引言 自1880年，在美国北卡罗来纳州首次发现了烟草青枯病以来[1][1]，。此后，由茄科雷尔氏菌 (青枯菌，Ralstonia solanacearum)引发的植物细菌型青枯病（bacterial wilt）已成为一种遍及全球的毁灭灾难性土传病害。全球范围内，其其普遍分布于在亚热带、热带等气候温暖的地区有广泛的分布[2][2]，在我国，也严重影响了南方的各多个省市也均有严重发生地区[3][3]。 青枯菌菌系复杂，宿宿主范围广泛，据不完全估计，可侵染超过50个科数百种植物[4][4]，严重影响了我国番茄[5]、马铃 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072$ 
薯[6][5]、玉米[7][6]、辣椒[8]、生姜[9][7]、番茄[8]、烟草[10][9]、辣椒[10]等农作物和经济作物的种栽植。因此，防控青枯病是一项刻不容缓的任务。
国际上每5年，国际上举办一次细菌青枯病学术研讨会，我国也于2016年在西南大学成功召开了第一届全国植物青枯病大会，对防控青枯病的各项研究进展进行了交流，也达成了一系列的合作广泛而深入的讨论和交流。但到目前为止,，生产上采取的各种青枯病防治措施仍然存在着各自的不足及局限性[11][11]。化学药剂的防治虽然简单方便见效快快捷、用法简单易行,，但容易产生农药残留，进而污染环境。而且，长期施用化学药剂也会增强病原菌的耐药性，破坏土壤微生态系统[1213][1213]。采用轮作、早播早栽、高起垄、高培土等农业措施可以推迟发病高峰期，降低损失，但是治标不治本，并且会受到各种多种自然、人为条件的限制[1415][1415]。选用抗性品种抵抗青枯病的措施经济有效，但青枯菌在不同环境下变异快，会产生各种不同的寄主专化型，所以不同的品种在不同的地区年份和地域年份的表现有差异。而且，随着种植年限时间的增加，同一品种的抗性会有逐渐丧失降低的趋势[15][15]。因此，进一步探索究青枯菌的致病机理以及新的防治方法和措施，具有重要的理论与现实意义重大。
来自英国和加拿大的微生物学家Twort和加拿大的细菌学家d’Herelle分别于1915年[16][16]和1917年[17][17]在各自的研究中发现了能够侵染细菌的病毒噬菌体（Bacteriophage 或 phage）。在抗生素尚未被发现的时代，这激起了无数科学家利用噬菌体治疗对抗细菌病害的热情[18][18]。由于早期的临床研究集中在前苏联、波兰等东欧国家且研究成果多为波兰语、格鲁吉亚语和俄语，再加上抗生素的大范围规模使应用，噬菌体治疗随后又逐渐淡了下去出了人们的视野[19][19]。近年来，随着抗生素的滥用，耐药菌种甚至“超级细菌”不断产生出现，尤其是“超级细菌”的出现让因而科学家把目光再度聚焦到““噬菌体疗法””的研究上来[2021][2021]。与抗生素相比，噬菌体特异性强、对土壤的微生态系统影响小、增殖能力强，在医疗和食品领域已有不少应用[1,22][1,22]。因此，鉴于青枯病是一种由细菌引发的病害，针对病原菌青枯菌开发相应的““噬菌体疗法””不啻为一种新型、可靠的防治途径。
利用土壤有益微生物（生防菌）以菌治菌，防控青枯病等土传病害作为一种无公害的新技术，具有无污染、可持续作用等益处优点，受到国内外研究者的广泛重视，是当前的又一研究热点[10][9]。芽孢杆菌（Bacillus sp.）是一类好氧或兼性厌氧的革兰氏阳性杆菌，能产生芽孢，抗逆性强，能产生芽孢，繁殖能力强，能够拮抗多种病原菌，其中就包括了对包括病原青枯菌在内的多种土传病害病原菌均有拮抗作用[23][23]。已有不少研究报道了枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)[24][24]、解淀粉芽孢杆菌 (Bacillus amyloliquefaciens)[23,25][23,25]作为生防菌的应用。但是，由于生态环境中的多种因素都可能影响微生物农药的防治效果，这导致生防菌的定殖较为困难不易，难以形成足够的生物群落从而降低防治效果，实际使用中常常发现其效果并不稳定[2627][2627]。土壤中噬菌体群体数量大，对土壤微生物群落的结构和功能有着重要影响[28][28]。而噬菌体对施入到土壤中的生防菌的存活和功能发挥有什么影响我们尚不清楚，利用生防菌防治土传病害效果不稳定是否是受到了生防菌噬菌体的干扰我们也不得而知。

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