采用盆栽砂培试验，研究不同浓度盐胁迫（0、25、50、75和100 mmol·L-1 NaCl）下荆芥幼苗的体外抗氧化能力、腺毛密度及其分泌物组成成分的变化。结果表明总酚和总黄酮含量在轻度（25 mmol·L-1）或中度（50 mmol·L-1）盐胁迫下增加，但在重度（75、100 mmol·L-1）盐胁迫下减少。荆芥叶片表面有两种腺毛盾状腺毛和头状腺毛。在盐胁迫下，尤其是中度和重度盐胁迫，荆芥叶片正反两面的总腺毛密度显著增加。腺毛分泌物中胡薄荷酮是第一主成分，盐胁迫导致胡薄荷酮和其他单萜类物质的相对含量显著减少，但会促进酯类物质的合成和累积，尤其是sulfurous acid,2-ethylhexyl hexyl ester，该物质随着盐浓度的增加逐渐成为腺毛分泌物的第二主成分。本研究从次生代谢角度研究了盐胁迫对荆芥幼苗的影响，可为荆芥对盐渍土适应性的进一步研究和品质调控研究奠定基础。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言（或绪论）1
1□材料与方法2
1.1□试验材料与盐处理2
1.2□化学试剂 2
1.3□多酚的提取与分析2
1.3.1□酚类物质的提取2
1.3.2□总酚含量（TPC）的测定2
1.3.3□总黄酮含量（TFC）的测定2
1.4□体外抗氧化能力测试3
1.4.1□DPPH自由基清除能力的测定3
1.4.2□ABTS+自由基清除能力的测定3
1.5□腺毛形态观察和腺毛密度统计3
1.6□荆芥叶表面腺毛分泌物的提取多3
1.7□用GC/MS检测荆芥腺毛分泌物组分变化4
1.8□数据统计分析4
2□结果与分析4
2.1□荆芥叶总酚和总黄酮含量测定4
2.2□荆芥叶抗氧化能力4
2.3□腺毛形态观察及盐胁迫对其密度影响5
2.4□盐胁迫对荆芥幼苗腺毛分泌物组成成分的影响6
3□讨论 8
致谢9
参考文献9
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氧化能力、腺毛密度及其分泌物的影响
引言
荆芥（Schizonepeta tenuifolia Briq.）是唇形科一年生草本植物，为常用的解表药，主要用于治疗头痛、感冒、发烧等[1]。除作药用，荆芥幼苗还可食用。现代药理学研究表明，荆芥提取物具有抗氧化、抗炎、止痒、抗病毒的作用[2]，而挥发油是其发挥药效的重要物质基础之一。荆芥挥发油的主要成分是单萜类物质，包括胡薄荷酮、d柠檬烯和薄荷酮[3]。2015版《中国药典》[4]规定，胡薄荷酮是检测荆芥药材质量的指标成分。研究发现，植物通常有专门的组织和细胞负责合成和储存次生代谢产物，如分泌腔、树脂道、乳汁管、腺毛（glandular trichomes）和树胶管等[5,6]。唇形科植物中，表皮毛结构即腺毛是合成、分泌和积累挥发油的场所[7]。腺毛通常位于植物体表面，其内含物具有亲脂性，所以除了用水蒸气蒸馏法提取挥发油，还可通过有机溶剂浸提腺毛分泌物[8]。
土壤盐渍化是导致全球农作物减产的非生物胁迫因素之一[9]。据联合国粮食和农业组织（the United Nations Food and Agriculture Organization, FAO）统计，全球有超过8亿hm2土地不同程度的受到盐渍化的危害[10]。我国大约有超过3 000万hm2的土地属于盐碱地[11]。此外，不合理的轮作、施肥和灌溉等更加剧了土壤的次生盐渍化。荆芥在我国大部分地区都能生长，但主要在我国东北和华北地区栽培。近几年来，由于施肥和灌溉管理不当，这些地区面临着土壤盐渍化的问题。众多研究表明，药用植物次生代谢产物的积累与其生长环境密切相关。因此，本研究采用盆栽砂培试验，探究了盐胁迫下荆芥抗氧化能力和腺毛密度及其分泌物的变化情况，对指导具有药食两用价值的荆芥的规范化栽培具有重要意义。
1 材料与方法
1．1 试验材料与盐处理
选取籽粒饱满、大小均匀的荆芥种子，播于装有栽培基质∶蛭石∶珍珠岩1∶2∶1（v: v: v）的盆钵中，置于日光温室内发芽，蒸馏水灌溉保持湿润。出苗后用1/4 Hoagland营养液浇灌培养。出苗37 d后，选取长势一致（高约15 cm）的幼苗，转入装有石英砂的塑料小花盆（上口径9.0 cm，下口径6.0 cm，高7.5 cm）中，每盆定苗2株，每个处理35盆。每盆隔2 d浇灌一次1/2 Hoagland营养液，每次200 mL，浇灌3次后进行胁迫处理。
分别用含有0（CK）、25、50、75和100 mmolL1 NaCl的1/2 Hoagland营养液每天浇灌1次，浇灌量为石英砂基本持水量的4倍，将前期的积余盐冲洗干净，以保持NaCl的浓度稳定。为避免盐冲击效应，采用渐进式进行NaCl处理，除对照组（CK）外，NaCl浓度每隔2 d以25 mmolL1递增，在同一时间达到不同处理浓度。盐胁迫处理12 d后可进行各项指标分析测定。荆芥整个培养过程均在日光温室内进行，温度15～30℃，空气相对湿度60%～80%。
1．2 化学试剂
FolinCiocalteu试剂，没食子酸标准品和芦丁标准品均购自上海源叶生物科技有限公司，2,2联氮二（3乙基苯并噻唑6磺酸）二铵盐（ABTS）和2,2二苯基1苦基酰肼（DPPH）购自东京化成工业株式会社，所有其他试剂均购自西陇科学试剂公司。
1．3 多酚的提取与分析
1．3．1 酚类物质的提取 荆芥叶样品在40℃下烘干至恒重，粉碎后过40目筛，称取约0.5 g，加10 mL 80%甲醇溶液，超声提取30 min。于4℃，4000× g条件下离心30 min。转移上清液，4℃保存备用。试验重复3次。
1．3．2 总酚含量（TPC）的测定 总酚含量的测定采用FolinCiocalteu法[12]进行测定，稍作改动。没食子酸为对照品，线性回归方程为：y=0.0043x+0.0189（R2=0.9997，n=3），式中x为没食子酸溶液质量浓度mgL1，y为A750 nm。取适当稀释的提取液，按方法步骤反应后，测定吸光度，将结果单位换算为每克样品中所含的多酚相当于没食子酸的毫克数（mg GAE/g DW）。试验重复3次。
1．3．3 总黄酮含量（TFC）的测定 黄酮含量的测定按照氯化铝比色法[13]进行测定。芦丁标准品为对照品，线性回归方程为：y=0001x+0.0052（R2=0.9964，n=3），式中x为芦丁溶液质量浓度mgL1，y为A510 nm。取适当稀释的提取液，按方法步骤反应后，测定吸光度，将结果单位换算为每克样品中所含的黄酮相当于芦丁的毫克数（mg rutin/g DW）。试验重复3次。
1．4 体外抗氧化能力测试

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