目的通过对活血丹品质及氧化还原相关土壤酶活性的测定，探究与氧化还原相关的土壤酶活性和活血丹药材品质的内在关联性。方法采集活血丹不同居群植株及其根际土壤，用TTC法测定脱氢酶活性，多酚氧化酶和过氧化物酶活性用邻苯三酚比色法测定，过氧化氢酶活性用高锰酸钾滴定法测定，活血丹总黄酮含量用分光光度法测定，熊果酸、齐墩果酸、绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸含量用HPLC法测定，利用统计软件分析其相关性。结果活血丹不同居群指标性成分和土壤酶活性差异显著，脱氢酶与绿原酸呈显著正相关、与咖啡酸显著负相关，与迷迭香酸呈极显著正相关；多酚氧化酶与咖啡酸呈显著正相关，与齐墩果酸呈显著正相关；过氧化物酶与总黄酮呈显著负相关，与绿原酸呈显著正相关；醇溶性浸出物与熊果酸呈显著负相关；总黄酮与绿原酸呈显著负相关，与熊果酸呈显著正相关；过氧化氢酶活性与活血丹活性成分含量均无显著相关性。结论影响活血丹药材品质的主要因素为脱氢酶活性、多酚氧化酶活性及过氧化物酶活性，过氧化氢酶活性对活血丹药材品质的影响较小。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
1 材料与方法 2
1．1 试验材料 2
1．2 与氧化还原相关的土壤酶活性测定 2
1．2．1 脱氢酶活性测定 2
1．2．2 多酚氧化酶活性测定 2
1．2．3 过氧化物酶活性测定 2
1．2．4 过氧化氢酶活性测定 2
1．3 活血丹指标性成分测定方法 2
1. 3. 1 醇溶性浸出物含量测定 3
1．3．2 总黄酮含量测定 3
1．3．3 三萜酸类化合物含量测定 3
1．3．4 酚酸类化合物含量测定 3
1．4 数据处理 3
2 结果与分析 3
2．1 活血丹不同居群的指标性成分含量差异 3
2．2 活血丹不同居群根际土壤与氧化还原相关的酶活性差异 4
2. 3 与氧化还原相关的土壤酶活性和活血丹药材品质的相关性研究 4
3 讨论 5
3．1 活血丹不同居群药 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
材指标性成分含量的差异性分析 5
3．2 活血丹不同居群土壤氧化还原相关酶活性差异 5
3．3 与氧化还原相关的土壤酶活性和活血丹药材品质的相关性分析 5
致谢 6
参考文献 6
与氧化还原相关的土壤酶活性和活血丹药材品质的相关性研究
引言
活血丹Glechoma longituba (Nakai) Kupr.为唇形科活血丹属植物，又名金钱薄荷、江苏金钱草、透骨草、大叶金钱草等[1]，其干燥地上部分入药，称连钱草[2]，味辛、微苦，性微寒，入肝、肾、膀胱经；有散瘀消肿，利尿排石，清热解毒等药用功能，用来医治跌打损伤、尿路、肝胆结石以及湿热黄疸等病症。活血丹主要分布在江苏、浙江一带，江苏产连钱草质量最佳，故为其道地产区之一[3]。目前对活血丹的研究主要集中在化学成分和药理作用研究方面。活血丹内在成分有醇溶性浸出物、酚酸类、黄酮类、三萜酸类等，其中三萜酸类成分有齐墩果酸和熊果酸；酚酸类成分主要有咖啡酸、绿原酸、迷迭香酸等。许莉等[4]研究表明连钱草可以利尿利胆、排石、降脂、抗炎、抗菌、降血糖以及对平滑肌产生影响等，在临床上可医治结石症、跌打损伤及流行性腮腺炎等症，目前是胆乐胶囊、排石颗粒、尿感宁颗粒等的主要原料。
土壤中生物化学反应多数有土壤酶的参与，包括动物、植物、微生物等残体有机质腐化降解形成腐殖质和营养元素的氧化还原等。土壤酶活性同土壤质量的许多理化指标有关。进入21世纪以后，不同生态系统土壤酶活性的研究已经成为生态学的热点问题之一。有学者曾提出土壤酶参与土壤碳、氮元素的循环，且是表征各种生态系统的作用、运作规律、营养元素供应状况等的动态指标[5,6]。土壤酶可以将有机质通过微生物的作用氧化为植物可利用的特殊的高分子聚合物，如 β葡糖苷酶（BG）可将来自纤维素的寡糖水解为小分子的葡萄糖；β1,4N乙酰氨基葡糖苷酶（NAG）可将来自动植物的多糖如几丁质和肽聚糖，水解成葡萄糖胺；酸性磷酸酶（AP）可水解土壤磷循环中磷酸酯为磷酸盐，其活性变化能用来指示土壤中速效磷转化为有效磷的程度；而土壤酶主要来源于土壤微生物的渗出。土壤氧化还原酶类是参与催化土壤中氧化还原反应的一类酶[7]，不仅在土壤腐殖质的形成中存在重要的影响[8]，还参与矿质营养元素的转化和循环。比如，土壤中生命活动的结果产生了酚类物质，土壤多酚氧化酶在酚类物质的氧化过程中扮演了重要的角色，继而成为一种似腐殖质的高分子聚合物；土壤胞内还原酶参与了反硝化作用的绝大部分进程；土壤脱氢酶（DHA）动态且有生命力地指示了不同微生物的各种活性[9,10]。
本研究通过活血丹植株指标性成分含量与其种源地土壤中氧化还原相关酶的酶活测定，分析了土壤中脱氢酶、多酚氧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶等氧化还原酶酶活与活血丹指标性成分的相关性，探讨了土壤中氧化还原酶类在活血丹药材品质形成中的作用，可为活血丹栽培技术提升提供技术参考。
1 材料与方法
1．1 试验材料
试验所用活血丹Glechoma longituba (Nakai) Kupr.由大学中药材研究所郭巧生教授鉴定。2018年9月在对活血丹分布统一调研后，选择将军山、栖霞山、上峰、紫金山、珍珠泉等5地作为采样点，每个采样点均采用5点法采样。取样时选生长健壮的活血丹植株，洗净、晾干、放入55℃烘箱烘干至恒重、打粉、过60目筛后于阴凉干燥处保存备用；同期在活血丹着生地距地面20 cm取根际土壤样品，去除石头等杂物，风干后于4℃保存备用。
1．2 与氧化还原相关的土壤酶活性测定
1．2．1 脱氢酶活性测定 TTC法测定[11]。
脱氢酶活性以（c*V）/（干土质量*24）表示。c:滤液TPF浓度 V:滤液体积 干土质量：2 g 培养时间:24 h
1．2．2 多酚氧化酶活性测定 邻苯三酚比色法测定[12]。
活性表示 ：多酚氧化酶的活性，表示为2 h后1 g土壤中紫色没食子素的毫克数。
1．2．3 过氧化物酶活性测定 邻苯三酚比色法测定[13]。
活性表示： 以两小时后，1 g土壤生成的紫色没食子素的毫克数表示过氧化物酶活性＝（a样品a空白a无基质）*V/m
a——标准曲线上相对应的浓度；V——显色体积，即为乙醚的体积35 mL
1．2．4 过氧化氢酶活性测定 高锰酸钾滴定法[14]。

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