雌二醇对蚂蟥性腺发育及性内固醇激素的影响【字数：7616】
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
前言 1
1 材料与方法 2
1.1材料 2
1.1.1 实验材料和试剂 2
1.1.2 主要仪器和设备 2
1.2 方法 2
1.2.1 实验设计 2
1.2.2 体重测定 2
1.2.3 激素测定 2
1.2.4 色谱与质谱条件 3
1.2.5 数据分析 3
2 结果与分析 3
2.1 不同浓度外源雌二醇对蚂蟥存活率的影响 3
2.2 不同浓度外源雌二醇对蚂蟥体重的影响 4
2.3 不同浓度外源雌二醇对蚂蟥性腺指数的影响 4
2.4 不同浓度外源雌二醇对蚂蟥体内雌激素含量的影响 5
2.5 不同浓度外源雌二醇对蚂蟥体内甲基睾酮含量含量的影响 5
2.6不同浓度外源雌二醇对蚂蟥体内黄体酮含量的影响 6
3 讨论 7
3.1 雌二醇对蚂蟥生长的影响 7
3.2 雌二醇对蚂蟥性腺发育的影响 7
3.3 雌二醇对蚂蟥体内雌激素的影响 8
3.4 雌二醇对蚂蟥体内雄激素的影响 8
3.5 雌二醇对蚂蟥体内孕激素的影响 8
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致谢 9
参考文献 10
雌二醇对蚂蟥性腺发育及性内固醇激素的影响
学生 程珍珍
引言
蚂蟥(Whitmania Pigra Whitman)，学名水蛭，又名宽体金线蛭，是《中华人民共和国药典》[1]收载的三种水蛭之一，其隶属于蛭纲(Hirudinea)无吻蛭目黄蛭科(Haemo pidae)动物[2]。其干制品泡制后中医入药，有破血、逐瘀、通经的功能。目前国内外对蚂蟥化学成分、药理作用、临床作用等方面都有了一定的研究，并且取得了极大的成果[35]。另外，蚂蟥的人工养殖技术也获得了初步成功[6]。同时对蚂蟥生长繁殖习性、遗传变异及基因序列也有很多研究[7]。另外，蚂蟥性腺及生殖细胞周年发育的组织学实验中发现蚂蟥是雌雄同体，精卵细胞有序发育，同步成熟[8]。
雌激素(Estrogen)呈脂溶性，属于性类固醇激素，是一种调控动物生殖发育非常重要的内源性类固醇激素。主要由动物卵巢产生，较少部分由胎盘、睾丸、肾上腺分泌产生。雌激素的主要生理作用是维持生育功能、促进雌性生殖系统的生长发育、维持和调控雌性副性器官以及调节物质代谢等功能。其广泛分布在全身各个系统中，这使得雌激素对全身各系统包括生殖系统、皮肤、骨骼、心血管、内分泌系统等各方面均有明显的影响[9]。
雌二醇(E2)是一种重要的雌激素，是动物体内最重要的活性雌激素，在卵巢发育和卵黄发生过程中起着举足轻重的作用。研究发现，生殖细胞受性类固醇激素的影响，生物体的性别分化和性腺发育均受到外源激素一定程度的控制。外源雌激素的剂量还可以控制生物的性别，影响性别分化比例，有时还会影响存活率。例如张晓彦等[10]通过雌二醇对半滑舌鳎生长和性别分化影响的研究，发现雌二醇对半滑舌鳎的性分化速度具有影响，但对其成活率和前期生长却没有影响作用。外源雌二醇对鱼类等其他无脊椎动物在性分化，性腺发育以及相关基因表达方面的研究，也取得了极大的成功[1114]。
近几年蚂蟥基础生物学、消化生理、呼吸生理等方面的研究[1517]，已经基本成熟，但关于雌二醇对蚂蟥内源激素含量、性分化及性腺发育等方面的研究还未见报道。因此，本实验通过观察不同浓度雌二醇(E2)对蚂蟥性腺发育以及体内性内固醇激素含量的影响，为进一步研究外源激素对蚂蟥性腺发育以及为蚂蟥生殖方面的进一步研究提供科学依据和指导。
1 材料与方法
1.1材料
1.1.1 实验材料和试剂
材料：实验用蚂蟥5.5月龄由大学中药材研究所蚂蟥实验室提供，经郭巧生教授鉴定为蚂蟥Whitmania pigra Whitman；实验所用螺蛳（采自南京玄武湖，野生）为梨形环棱螺Bellamya purificata Heude。（规定出卵茧孵出1 个月的蚂蟥为1月龄）
试剂：雌二醇、叔丁基甲醚、10% Na2CO3溶液、20%甲醇溶液、甲醇溶液、乙腈溶液、液氮
1.1.2 主要仪器和设备
分析天平（FA 1104型，上海精密科学仪器有限公司），旋涡混匀器（HYQ2121A型，苏州捷美电子有限公司），超声波发生器（JXDP03型，北京博朗德科技有限公司），圆形水浴氮吹仪（YYDCY12Y型，上海允延仪器有限公司），循环水式多用真空泵（SHZIII型，临海市潭氏真空设备有限公司），高速离心机（XZ16T型，长沙湘智离心机有限公司），高效液相色谱仪（1200系列，美国安捷伦公司），电喷雾飞行时间质谱仪（美国Applied Biosystems公司）。
1.2 方法
1.2.1实验设计
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