金银花中绿原酸的提取工艺及其抗氧化活性的研究
Keywords: honeysuckle; chlorogenic acid; response surface; anti目 录
1 绪论 1
1.1 研究的意义 1
1.2 金银花概述 1
1.2.1 金银花化学成分 1
1.2.2 金银花药理作用 2
1.3 绿原酸的提取方法 3
1.3.1 溶剂浸提法 3
1.3.2 回流提取法 3
1.3.3 超临界CO2萃取法 3
1.3.4 超声波提取法 3
1.3.5 微波辅助提取法 4
1.4 绿原酸的药理作用 4
1.4.1 抗氧化 4
1.4.2 抗菌 4
1.4.3 抗癌 4
1.4.4 降血压 4
1.4.5 保护心血管和中枢神经系统 5
1.4.6 抑制糖尿病 5
1.4.7 抗紫外和抗辐射 5
1.4.8 抗白血病 5
1.4.9 免疫调节 5
1.4.10 细胞保护 6
1.4.11 保肝 6
1.4.12 抗内毒素 6
1.4.13 抗抑郁和抗焦虑 6
2 实验 7
2.1 实验材料及仪器 7
2.2 标准溶剂的配制 7
2.2.1 试剂配制 7
2.2.2 波长的选择 7
2.2.3 标准曲线的绘制 8
2.3 金银花中绿原酸的提取工艺 8
2.4 单因素试验 8
2.4.1 液料比对绿原酸提取率 *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072#
的影响 8
2.4.2 超声时间对绿原酸提取率的影响 8
2.4.3 超声功率对绿原酸提取率的影响 9
2.4.4 超声温度对绿原酸提取率的影响 9
2.5 金银花中绿原酸提取率的计算公式 9
2.6 响应面优化提取工艺 9
2.7 金银花中绿原酸的抗氧化能力测定 10
2.7.1 清除DPPH能力测定 10
2.7.2 清除ABTS能力测定 10
3 实验结果与分析 11
3.1 绿原酸的标准曲线 11
3.2 单因素实验结果 11
3.2.1 液料比对绿原酸提取率的影响 11
3.2.2 超声时间对绿原酸提取率的影响 12
3.2.3 超声功率对绿原酸提取率的影响 12
3.2.4 超声温度对绿原酸提取率的影响 13
3.3 响应面实验结果及分析 13
3.3.1 响应面实验 13
3.3.2 响应曲面法 13
3.3.2 回归模型方程 15
3.3.3 各因素对绿原酸提取率影响的响应面图 16
3.3.4 响应面预测值验证 18
3.4 绿原酸抗氧化活性研究 19
3.4.1 对DPPH的清除作用 19
3.4.2 对ABTS的清除作用 19
3.5 结果与分析 20
结论 21
参考文献 23
致谢 25
1 绪论
1.1 研究的意义
随着金银花相关研究的不断深入,它的药理活性也被比较深入的研究,比如抑菌、抵抗病毒[1,2]、消炎[3]、护卫肝脏[4]、减轻血糖程度[5]、抗氧化作用[6]及治疗出血[7]等。金银花的化学成分主要包括:有机酸,挥发性油,环烯醚萜和三萜化合物[8]。
1.2 金银花的综述
1.2.1 金银花中的成分
(1)挥发油类
它鲜干花内的挥发油成分也拥有相对大的区别[9]。经研究显示,干花内的挥发油含有的成分比较多,大概有60种。而且,软脂酸的含量是其中最多的,约占比26 % ,其它有效成分主要包括醇类、醛及烷烃等[10]。
(2)有机酸类
其是从金银花中最早被分离出来并进行研究的物质,异绿原酸指的是有数种不同的异构体组合而成的混合酸类成分。
(3)黄酮类
最近数年,相关研究人员从金银花中分离出了众多黄酮类化合物。而且,经研究后发现,在不同生长时期金银花的药用植物源植物忍冬中,也含有黄酮类化合物。部位不同时,黄酮的含量也有差别。
(4)苷类
近年来,皂苷是人们在众多化合物中研究比较多的物质,三萜皂苷更甚,它具有多种明显的生物学活动,如保肝,消炎等。而且,众多研究人员已经从金银花汇总分离出了多种皂苷类物
(5)微量元素
微量元素在人类健康有重要作用,其在金银花中也存在广泛分布,比如Fe、Cu、Ti、Mo、Ni、Pb、Co、Ca等[11]。
1.2.2 金银花药理作用
其作用关键的是抗菌杀菌,抵抗炎症,去热清火,抵抗病毒和提高人体抵抗力等[1214]。
(1)抗菌
除金银花外,其药用植物源植物忍冬叶和藤的提取物对多种细菌亦存在抑制作用,例如,金黄色葡萄球菌,霍乱弧菌,伤寒杆菌。除前述细菌外,随着研究的不断深入,金银花提取物可以抑制的细菌又有所增加,如肺炎球菌、志贺氏痢疾杆菌和绿浓杆菌等,主要表现为抗菌谱不断扩大。
(2)抗炎解热
近年来,金银花的抗炎和解热作用已得到证实。在动物实验中,金银花的水煎液表现出了一定的抗炎效果,而且其与银翘配伍的水煎剂也具有类似的抗炎效果。然而,金银花用于治疗炎症的机制尚未明确。
(3)保肝利胆
在保护肝脏和胆囊中发挥作用的金银花的化学成分主要是绿原酸,它可以促进胆汁的分泌。起到利胆的效果。另外有研究表明,从黄褐毛忍冬中提取的总皂苷也能够起到降低肝脏损伤的作用,同时,能够让肝脏发生点状坏死的频率得到显著降低。
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