摘 要 荚果蕨(Matteuccia struthiopteris(L.)Todaro) 是球子蕨科(Onocleaceae)荚果蕨属(Matteuccia Todaro)多年生草本植物，又名荚果蕨贯众、广东菜、黄瓜香。荚果蕨贯众是我国主要的五种贯众之一，植珠全身均可药用，含有多糖、黄酮、甾萜类等多种药用成分，具有清热解毒、杀虫、抗氧化及保肝等多种作用。同时，它富有多种营养成分，如蛋白质、脂肪和粗纤维等，是药食两用的中药材。 据相关研究表明三萜类化合物具有抗癌、抗病毒、降血糖、保肝及治疗糖尿病等多种药用功效；同时荚果蕨贯众中富含有三萜类化合物；因此，本文研究了正交设计法优化荚果蕨贯众总三萜微波提取工艺；旨为荚果蕨贯众在以后的合理开发和研究中提供理论依据，研究结果如下： （1）单因素实验设计提取工艺，以不同的乙醇浓度、料液比、微波提取温度、微波提取时间、微波提取功率为实验因素，以荚果蕨贯众总三萜成分的含量为指标进行分析比较各因素对总三萜含量的影响,初步得出结果：乙醇浓度为60%、料液比为1:30g/mL、微波提取温度为60℃、微波提取时间为4min、微波提取功率为300W时提取的总三萜成分含量较高。（2）运用正交设计法优化荚果蕨贯众总三萜微波提取工艺，选取影响荚果蕨贯众总三萜成分提取含量较大的因素：乙醇浓度、料液比、微波提取温度、微波提取时间为正交设计的实验因素来分析优化工艺条件,得出最优提取条件为：乙醇浓度60 %，料液比1:30g/mL，微波提取温度60℃，微波提取时间3 min。目 录
1 绪论
1.1 荚果蕨贯众的研究概况 1
1.1.1荚果蕨贯众概述 1
1.1.2荚果蕨贯众的药理活性研究 2
1.2 三萜类化合物的研究概况 3
1.2.1三萜类化合物概述 3
1.2.2总三萜的提取方法 3
1.2.3三萜类化合物药理活性研究 4
1.3 本课题研究的内容、目的及意义 6
2 正交设计法优化荚果蕨贯众三萜的微波提取工艺
2.1 实验材料与仪器 7
2.1.1实验材料与试剂 7
2.1.2仪器 7
2.2 实验方法 8
2.2.1药材预
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/> 1.2.2总三萜的提取方法 3
1.2.3三萜类化合物药理活性研究 4
1.3 本课题研究的内容、目的及意义 6
2 正交设计法优化荚果蕨贯众三萜的微波提取工艺
2.1 实验材料与仪器 7
2.1.1实验材料与试剂 7
2.1.2仪器 7
2.2 实验方法 8
2.2.1药材预处理 8
2.2.2齐墩果酸标准曲线的绘制 8
2.2.3荚果蕨贯众总三萜含量测定 8
2.2.4方法学考察 8
2.2.5单因素实验设计提取工艺 9
2.2.6正交实验设计优化提取工艺 10
2.2.7数据处理 10
2.3 实验结果与分析 10
2.3.1标准曲线 10
2.3.2方法学考察结果分析 10
2.3.3单因素实验结果分析 11
2.3.4正交设计法优化荚果蕨贯众总三萜提取工艺实验结果分析 14
2.3.5最优工艺验证 16
2.4 结论 17
结论 18
参考文献 19
致谢 22
1 绪论
1.1 荚果蕨贯众的研究概况
1.1.1 荚果蕨贯众概述
荚果蕨贯众（Matteucci astruthiopteris（L.）Todaro）为球子蕨科（Onocleaceae）荚果蕨属（Matteuccia Todaro）荚果蕨的干燥根茎及叶柄残基；又称为荚果蕨、广东菜、黄瓜香，根状茎直立呈深褐色；叶是二型簇生犹如莲座，孢子叶为1回羽状叶；通过孢子和营养两种方式繁殖[1]。
荚果蕨贯众是商品贯众的一种，植珠全身均可药用，含有多种药用成分：如萜类、黄酮类和多糖等[23]。此外荚果蕨贯众中还是药食两用的中药材[4]。主产于我国的东北三省、河北等地，常生长于山谷、河岸等湿地[5]。
荚果蕨贯众中的有效成分可根据其所含官能团和不同的侧链，主要分为以下5种如：黄酮类成分有荚果蕨黄素、芹菜素等；甾体类成分有坡那甾酮A、蜕皮甾酮等；三萜类成分是狗脊蕨酸；苯丙素类成分有咖啡酸、对香豆酸等；糖类成分有D葡萄糖、D甘露糖醇等；其他类成分有甘油酯类、二苯乙烯类等[6]。其中三萜类成分是荚果蕨贯众的主要有效成分之一，具有抗氧化、抗菌等药理活性[7]。
1.1.2 荚果蕨贯众的药理活性研究
（1）抑菌作用
梁立春[8]等对荚果蕨水提物与醇提物的抑菌作用进行了对比。检测结果显示各治疗组小鼠肠道的乳酸杆菌、双歧杆菌数量升高，肠球菌、肠杆菌数量下降；此外从检测结果知荚果蕨醇提物组的治疗效果优于水提物组的治疗效果，从而表明荚果蕨水提物或醇提物两者都可以使小鼠肠道菌群失调得到一定的缓解，也起到一定的抑菌作用。
（2）抗癌作用
据有关文献获知荚果蕨贯众的水提物及水提物联合顺铂对患有腹水瘤肝癌的小鼠有预防和治疗作用。检测结果显示使用该药物后可以减轻细胞的炎症和坏死程度、提高小鼠巨噬细胞的吞噬能力和机体免疫力，以此来提高小鼠机体的抗癌能力[9]。此外荚果蕨贯众的水提物不仅能增强肿瘤小鼠的免疫力还能抑制H22癌细胞的生长和转移且联合治疗组效果最优[10]。
（3）保肝作用
有学者对荚果蕨贯众多糖对酒精诱导的小鼠急性肝损伤的保护作用进行了研究。从检测的小鼠血清和肝组织的各生理生化指标的结果，可以得出荚果蕨贯众多糖能够有效的清除小鼠肝脏中氧化应激和脂质过氧化产生的有害产物，从而起到缓解和治愈受损肝脏的作用[11]。
（4）抗氧化作用
荚果蕨贯众醇提取物有较好的抗氧化作用，李姝蓓[12]对其体内与体外抗氧化作用都进行了相关研究。实验表明荚果蕨贯众醇提取物有较强的抗氧化作用。此外，荚果蕨贯众多糖也具有清除自由基的能力同时还对Fe3+具有较好的还原能力，且在一定的浓度范围内会呈正相关，因此说明荚果蕨贯众多糖有较好的体外抗氧化作用[13]。
（5）其他作用
据有关报道可知荚果蕨贯众总多糖（Ms）还可以防治由空肠弯曲杆菌 CJS131引起的红斑狼疮样综合征。实验结果表明，Ms不仅能显著抑制总IgG、尿蛋白等的升高，同时还可以改善肾脏病理损伤，荚果蕨贯众多糖在自身免疫性疾病的防治领域具有一定的治疗价值[14]。此外，荚果蕨贯众水提物可以通过调控糖尿病小鼠体内的益菌群；抑制小鼠脂质代谢来降低血脂水平，如甘油三脂、总胆固醇及低密度脂蛋白的含量降低，从而达到治疗糖尿病的目的[15]。
1.2 三萜类化合物的研究概况
1.2.1 三萜类化合物概述
三萜类化合物是由数个异戊二烯为单位聚合而成的聚合物。其在自然界中广泛存在，如灵芝、甘草、夏枯草等药材中均富含有三萜化合物[16]。
1.2.2 总三萜的提取方法
三萜类化合物一般选用乙醇或甲醇作为提取溶剂。其提取方法主要有以下四种：
（1）传统提取法
浸提法和回流法[17]根据相似相溶原理，选择适当的有机溶剂充分浸渍药材；细胞内的有效成分随着细胞内外浓度差的变化不断的溶出从而完成有效成分的提取。传统
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