目 录
1 引言 1
1.1 黑豆概述 1
1.2 花色苷概述 1
1.3 本课题研究的意义和内容 6
2 实验材料与方法 7
2.1 实验材料 7
2.2试剂与仪器 7
2.3实验步骤与方法 7
3 结果与讨论 9
3.1 最大吸收波长的确定 9
3.2 花色苷标准曲线的制作 10
3.3 黑豆中总花色苷含量测定结果 11
3.4 水提单因素实验结果与分析 11
3.5 确定最佳提取方案 13
3.6 正交试验结果与分析 14
3.7 黑豆花色苷清除DPPH自由基活力 15
结论 17
致谢 18
参考文献 19
1 引言
1.1 黑豆概述
黑大豆为豆科植物，又称黑豆，属于食药两用的物质。其具有高蛋白、低热量的特性，其中蛋白质含量居各种豆类之最，因此也获得了“豆中之王”的美称。还具有润肺清热、补血安神、明目健脾、补肾益阴、解毒等药用功效。
1.1.1黑豆资源状况
黑豆适应生态环境、特别是适应恶劣环境的能力极强，无论在旱地还是在盐碱地，均可以种植。由于各地的生态环境不同，如光照长短、气温高低的，土壤的肥沃或贫瘠及含水量多少等差别，形成了许多与环境相适应的品种。在我国的大豆资源中，黑豆原产中国辽宁，吉林，安徽  ，现河南 、河北  *51今日免费论文网|www.jxszl.com +Q: ^351916072* 
675.htm>、山东 、江苏 亦有种植。其数量仅次于黄豆，居第二位。
1.1.2 黑豆营养成分
黑豆营养丰富，含有蛋白质 、脂肪、维生素 、微量元素等多种营养成分，同时又具有多种生物活性物质，如黑豆色素、黑豆多糖和异黄酮 等。中药学中常以乌豆衣入药，对乌豆衣的成分分析结果表明其主要成分是花色苷、纤维素、果胶等，可见，具有药理作用的就是黑豆皮中的花色苷[1]。
1.1.3 黑豆保健作用
黑豆含有丰富的生物活性成分，因此具有丰富有效的保健功能。黑豆多糖对吞噬细胞有免疫作用，且具有抗衰老的功效。黑豆中的卵磷脂具有健脑益智及防治大脑老化、中风、老年痴呆等作用[2]。黑豆中的另一个重要的生物活性成分是黑豆色素，是黑豆中起保健作用的主要功效成分。Kwon SH[3]对大鼠进行高脂膳食试验，研究表明：黑豆种皮中提取的花青素具有抗肥胖、降血脂的功效。黑豆脂肪酸能防止血清中胆固醇的增加和沉淀，对防止高血压和心血管疾病有重要作用[4]。
1.2 花色苷概述
花色苷是花色素 与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，使其呈现由红、紫红到蓝等不同颜色。花色苷是类黄酮 ——以黄酮核为基础的一类物质中能呈现红色的一族化合物。但花色苷因强烈吸收可见光而区别于其它天然黄酮类化合物。由于其独特的功能性，而被应用于清除体的名称、结构以及主要来源见表1 [2]。
内自由基、增殖叶黄素、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化 和血小板 凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等。
花色苷作为一种天然色素，安全、无毒，且对人体具有许多保健功能，已被应用于食品、保健品、化妆品、医药等行业。
花青素是不含糖基的花色苷，花青素类色素广泛存在于蓝莓、葡萄、紫甘薯、樱桃、草莓、桑葚、山楂皮、紫苏、 黑(红)米等植物的组织中。花青素是一种水溶性色素，可以随着细胞液的酸碱改变颜色。细胞液呈酸性则偏红，细胞液呈碱性则偏蓝。花青素(anthocyanidins)是构成花瓣和果实颜色的主要色素之一。所以，大多偏红色、紫色的蔬果都含有花青素。
1.2.1 花色苷的生物活性研究现状
1.2.1.1降血脂作用
花色苷的降血脂作用也有文献记载。对ApoE基因缺陷小鼠投食300m留(kgd)含黑米花色苷提取物的氮化铝-93G(AIN-93G)，试验结果表明，黑米花色苷能够显著降低小鼠血清甘油三酯（TG)和总胆固醇(TC)含量，减小动脉粥样硬化不稳定斑块面积，效应与临床常用的降血脂药物辛伐他汀(simvastatin)相似[5]。秦玉等[6]观察黑米花色苷提取物胶囊治疗高脂血症的临床疗效。结果表明黑米花色苷提取物胶囊具有明显的辅助降血脂作用。
1.2.1.2抗炎活性
花色苷在多个体内体外试验研究当中都表现出了良好的抗炎特性。Wang等[7]给冠心病患者膳食补充黑米皮干预6个月，发现可以显著降低患者血浆可溶性血管细胞粘附因子、可溶性CD40配体和高敏C反应蛋白等炎症因子的水平。花色苷还可以通过调节毛细血管的通透性，减轻炎症反应与一般抗炎药物不同的是，花色苷可以促进二型胶原的合成[8]。黑米花色苷能够通过抑制一氧化氮合酶的活性抑制小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO水平[9]。
1.2.1.3抗癌活性
研究表明，花色苷可能具有抗癌活性。Ye等[10]用体外培养的方法研究了花色苷对某些人类癌细胞及正常细胞的选择性毒性作用。其结果显示，花色苷可呈时间和浓度依赖性地抑制培养的人MCF-7乳癌细胞、人CRL-1739胃腺癌细胞和人A-427肺癌细胞，同时可提高人正常胃黏膜细胞和人J774A.1尿道上皮细胞及大鼠巨噬细胞的生长和活力，说明对正常和恶性细胞有不同甚或相反的作用。
1.2.1.4 抗氧化和抗衰老的功能
类胡萝卜素早就有研究报道，所以它的抗氧化功能己众所周知，而相比花色苷类化合物就发现的比较晚些，近些年才有报道多酚类中的花色苷类化合物的功能，逐步的引起了重视。花色苷类化合物的抗氧化活性与它们的化学结构有一定的关系，从结构上分析，花色苷类化合物由三个苯环与环上的取代基组成的，由于取代物的加入使减弱了B环上的羟基键的强度，易脱去羟基上面的氢被取代，进而生成比较稳定的醌类自由基，因此可以和自由基之间发生抽氢反应，阻碍了自由基的链式反应的发生，进而表现了具有抗氧化的保护作用[11]。花色苷可以提供羟基作为供体，同时也发生过氧化，是很好的自由基清除剂，具有可再生的作用。含有专家证明花色苷能与生物大分子结合而阻止脂质过氧化。在适当的条件，可以发生螯合反应，如金属离子铁、铜等，可以阻止体内的 Vc 发生过氧化作用或者重新合成 Vc，进而对氧化的单线态氧反应有抑制作用。

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