目 录
1 引言 2
1.1 人参属药材 2
1.2 皂苷的概述 2
1.3 人参皂苷的成分分析方法 2
1.4 人参皂苷的分离纯化方法 4
1.5 人参皂苷的转化方式 5
1.6 研究意义及内容 6
2 实验部分 6
2.1 实验仪器 6
2.2 实验设备 7
2.3 实验试剂 7
2.4 分离纯化方法的探究 8
3 结果与讨论 13
3.1 HPLC方法的确定 13
3.2 人参属药材酶转化物重结晶 16
3.3 大孔吸附树脂法静态饱和吸附量的测定 17
结 论 20
致 谢 21
参考文献 22
1 引言
人参属药材主要包括人参（Panax ginseng C.A.Meyer）、西洋参（P. quinquefolius L）和三七（P. notoginseng (Burk.) F.H.Chen）。人参属药材在医药卫生领域最具代表性的成分是人参皂苷。近年来，国内外的研究人员对人参皂苷的研究日益增多。并在人参属药材中不断发现新的人参皂苷。其中包括稀有人参皂苷，稀有人参皂苷的药理活性明显高于市面上普通的人参皂苷，而稀有人参皂苷含量有限又较难提取获得，因此人们研究采用生物转化法、微生物法、酶法转化制备稀有人参皂苷。
1.1 人参属药材
1.1.1 人参概述
人参主要分布在中国东北部的长白山区，作为中国人民的主要药物，在中国已经使用上千年。根据药效分类，人参属药材的上品。我国现存最早的本草专著《神农本草经》将其列为上品，谓“人参，味甘微寒 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
，主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智，久服，身轻延年”，药理学研究表明，人参皂苷是人参的主要有效成分，按苷元基本骨架可分为齐墩果烷型和达玛烷型，均为三萜类化合物[1]。
到目前为止，已分离鉴定40余钟人参皂苷单体，其中5种主要皂苷（人参皂苷Rb1、Rb2、Re和Rg1）占总皂苷的80% 以上[2]。而Rd、Rg3、Rh2和Compound K等稀有皂苷，在临床疾病方面的应用优于主要人参皂苷，现在逐渐成为人参属药材活性成分研究的主要内容之一。
1.1.2 西洋参概述
西洋参又名西洋人参、洋参、花旗参、广东人参，为五加科植物，主产于美国、加拿大及法国[3]。现已在我国东北、北京、陕西等省市引种成功。西洋参具有抗肿瘤、抗氧化、降糖及降血压、止吐、抗惊厥和精神保护的作用。人参皂苷是西洋参的主要成分。
1.1.3 三七概述
三七是我国传统珍贵药材，为五加科植物，干燥的根入药。含有多种单体皂苷，具有扩张血管、降低心肌耗氧量、抑制血小板聚集、降血脂、抗炎、抗氧化等多种药理作用[4]。主要功能为活血化瘀、消肿止痛，现主要用于心、脑血管系统疾病的治疗。主产于我国云南文山、广西靖西[5]。
1.2 皂苷的概述
1.2.1 人参皂苷的种类
根据苷元部分差异不同，人参皂苷主要分为原人参二醇组皂苷、原人参三醇组皂苷、齐墩果酸型人参皂苷等3类。原人参二醇组皂苷主要包括人参皂苷Ra1、Ra2、Rb1、Rb2、Rc、Rd、F2、Rg3、Rh2、CK、PPD。原人参三醇型皂苷主要包括人参皂苷Re、Rg1、Rf、F1、Rg2、Rh1。齐墩果酸型人参皂苷为人参皂苷Ro。
其中人参皂苷Rd、Rg3、Rh2、CK、PPD、F2、Rh1等为稀有人参皂苷，不存在于或较少存在于人参属药材中的非天然皂苷，而需要通过生物转化或化学转化而获得，稀有皂苷较天然皂苷有较强的药理活性，在医药研究方面的应用十分广泛，可以有效地促进癌细胞细胞凋亡、逆转白血病细胞细胞耐药性、通过调节蛋白激酶C的活性及糖皮质激素样受体作用、抑制肿瘤细胞的增殖等都具有很好的功能。
1.2.2 不同部位皂苷含量
人参须根中含有较高含量的人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Re，6种单体人参皂苷成分为3.801%；人参芦头含有较高含量的人参皂苷Rb1、Rb2，6种单体的含量为2.485%；人参茎叶含有较高含量的人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Re、Rg1，6种单体人参皂苷含量为7.466%；西洋参根含有较多的人参皂苷Rb1 、Re，6种皂苷含量为3.616%；西洋参芦头含有较高的人参皂苷Rb1和Re，6种人参皂苷含量为4.728%；三七根含有较高含量的Rb1 和，6种单体人参皂苷含量为5.704%，是人参根所含人参皂苷的5倍。三七芦头中含有较高的人参皂苷Rb1 和Rg1，6种单体人参皂苷含量为9.527%[6]。
人参皂苷Rb1和Rg1在三七芦头中含量最高，人参皂苷Re则在人参茎叶中含量最高。深入研究皂苷类成分在不同部位的成分含量有利于对人参皂苷单体进行高纯度的提取分离，提高对人参属药材的提取的纯度，提高有效成分的提取效率，有益于新型药物的开发。
1.3人参皂苷的成分分析方法
人参皂苷是人参中最主要的活性成分，目前对于人参皂苷成分的检测由原 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: *351916072* 
来的薄层色谱、分光光度等方法发展到如今的超高效液相色谱—飞行时间质谱技术[7]。在各种人参皂苷检测技术中，HPLC因为具有较高的检测灵敏度，结果准确，快速，简便的操作方法，有良好的重现性因而较其他检测技术更多的得到检测人员的青睐。
1.3.1 HPLC
因为人参皂苷类成分不含有共轭链，所以此类化合物的紫外吸收并不存在，但是采用UV检测器末端吸收同样能够检测出皂苷类成分。在HPLC法中紫外检测器最常用，但因人参皂苷的结构中缺乏生色团，如共轭双键，二被限制于只能使用低波长检测，通常为203nm。HPLC法作为一种分析方法，在1975年《美国药典》中得到了应用[8]。
1.3.2 GC-MC法
采用GC-MS方法测定了各种人制剂商品，以定量测定非糖部分（20s-ppd 20s-ppt齐墩果酸）为基础，测得纯人参制剂皂苷含量约为1.9% ~ 8.1%（以人参皂苷Rg1 、Rb1 、Ro为标准，人参三醇作内标）；在不同的人参制剂中，皂苷含量变化从49%到13.3%[8]。 这种方法是利用气象色谱对混合物的高效分离能力和质谱对醇组分的准确鉴定能力而发展起来的一项技术。迄今为止，GC-MC已广泛应用于石油化工、环境保护、医药和生命科学等领域。
GC-MC法既发挥了色谱法的高分离能力，又发挥了质谱法的高鉴别能力，该技术适用于多组分混合物中未知组分的定性鉴定，能够有效地对皂苷类成分进行物质成分的分析。其缺陷是只能分析人参二醇及人参三醇类，而不能分析单一的人参皂苷[9]。
1.3.3 薄层扫描法
TLC法可以对化合物成分直接进行组分含量的定量分析。通过选择合适的测定参数对薄层斑点进行光谱扫描，获得薄层色谱扫描图。利用组分斑点的光谱扫描图既可以进行定性分析与鉴别，又可以进行定量分析。TLC法主要应用于中药材的品种鉴别、中成药的鉴别、中药薄层指纹图谱鉴别、中草药成分分析、中成药的含量测定及质量标准研究。
表3 实验设备
设备名称 型号 厂家

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