目录
摘 要 Ⅰ
ABSTRACT Ⅱ
第一章 文献综述 1
1 瘤胃的基本组成和结构 1
2 研究瘤胃发育的重要性 1
3 营养干预手段调控瘤胃发育进展 2
4 苜蓿调控瘤胃发育进展 3
第二章 正文 4
1 引言 4
2 实验材料与方法 5
2.1 实验设计与动物饲料 5
2.2 样品采集 5
2.3 瘤胃上皮形态学观察 5
2.4 总脱氢酶和纤维素酶的测定 5
2.5 mtDNA和ATP含量的测定 6
2.6 线粒体呼吸链酶活性的测定 6
2.7 羔羊瘤胃上皮RNA的提取和cDNA的合成 6
2.8 引物的合成和实时定量PCR 7
2.9 数据处理 8
3 结果与分析 8
3.1 瘤胃上皮形态 8
3.2 补饲苜蓿干草对羔羊瘤胃内总脱氢酶和纤维素酶含量的影响 8
3.3 补饲苜蓿干草对羔羊瘤胃组织线粒体呼吸链酶活性的影响 9
3.4 补饲苜蓿干草对瘤胃上皮周期蛋白mRNA表达的影响 9
3.5 补饲苜蓿干草对羔羊瘤胃组织线粒体生物发生基因mRNA表达的影响 10
3.6 羔羊瘤胃组织线粒体生物发生基因mRNA表达量与细胞周期蛋白mRNA表达量的相关性分析 10
4 讨论 11
4.1 补饲苜蓿干草对羔羊瘤胃上皮发育的影响 11
4.2 补饲苜蓿干草对瘤胃内总脱氢酶 和纤维素酶活力的影响 11
4.3 补饲苜蓿干草瘤胃线粒体呼吸链酶活性的影响 12
4.4 补饲苜蓿干草对瘤胃上皮周期蛋白mRNA表达的影响 12
4.5 补饲苜蓿干草对瘤胃组织线粒体生物发生基因mRNA表达的影响 13
第三章 结论与展望 14
1 结论 14
2 展望 14
参考文献 15
致 谢 19
补饲苜蓿干草对羔羊瘤胃发育和线粒体功能的影响
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/> 摘 要
本试验旨在探讨补饲苜蓿开食料对羔羊瘤胃上皮发育的影响及作用机制。选取12头12日龄、体重相近、体况良好的湖羊羔羊，随机分为对照组（Control group，CON）和试验组（Treatment group，TG），每组6个重复。经过3天适应期后于15日龄开始正式试验。奶粉组羔羊自由采食配置好的羊奶粉，干草组羔羊给予600 mL配置好的羊奶粉并自由采食苜蓿干草。42日龄时于晨饲23小时后将羔羊进行屠宰，分离瘤胃后，将瘤胃组织使用无菌PBS（pH=7）冲洗干净。采集瘤胃腹囊上皮，用于瘤胃上皮形态学观察，另采集一部分瘤胃乳头剪碎后液氮保存，用于线粒体生物发生基因、细胞增殖基因mRNA表达。采集瘤胃液20℃冰箱保存，用于总脱氢酶和纤维酶活性测定。（结果）结果表明，试验组羔羊瘤胃乳头长（P < 0.001）、宽（P < 0.001）以及瘤胃上皮吸收面积（P < 0.001）均显著高于对照组，但两组单位面积瘤胃乳头数无显著差异。试验组瘤胃液中总脱氢酶（P = 0.001）和纤维素酶活性（P = 0.001）均显著高于对照组。试验组羔羊瘤胃组织中mtDNA拷贝数（P = 0.003）和ATP含量（P = 0.002）显著高于对照组，线粒体呼吸链复合酶1活性（P = 0.012）显著高于对照组，但两组羔羊瘤胃组织中线粒体呼吸链复合酶2和复合酶4均无显著差异。试验组羔羊瘤胃组织中CCND1及CCNE的mRNA相对表达量显著高于对照组，但CCNB1、CDK4、CCNA和CDK2的mRNA相对表达量没有显著差异。试验组羔羊瘤胃组织中OPA1和MID4的mRNA相对表达量显著高于对照组，但MFN1的mRNA相对表达量显著低于对照组，而MFN2，MIEF1，FIS1，DRP1的mRNA相对表达量在两组间无显著差异。相关性分析结果显示，羔羊瘤胃组织细胞周期蛋白CCND1的mRNA相对表达量与OPA1（P = 0.042，r = 0.512）和MID49（P = 0.031，r = 0.539）的mRNA相对表达量呈显著正相关。以上结果表明，羔羊补饲苜蓿开食料促进了羔羊瘤胃乳头的发育，推动了瘤胃组织细胞周期循环进程，而线粒体成熟在瘤胃发育进程中扮演着重要的角色。

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/609201.html