目录
摘 要 Ⅰ
ABSTRACT Ⅱ
第一章 文献综述 1
1 自噬的研究进展 1
2 自噬与早期胚胎发育过程 2
2.1 自噬与精子发生 2
2.2 自噬与卵子发生 2
2.3 自噬与早期胚胎 2
2.4 自噬与胚胎干细胞 2
3 组织蛋白酶的研究进展 3
3.1 组织蛋白酶B和组织蛋白酶K的研究 3
3.2 组织蛋白酶D的研究 3
第二章 试验 5
1 材料与方法 5
1.1 试验动物与样品采集 5
1.2 引物设计与合成 5
1.3 总RNA提取 5
1.4 cDNA的合成 6
1.5 PCR法扩增CTSD 7
1.6 实时荧光定量PCR 8
1.7 在线网站统计与分析CTSD的表达模式 8
2 结果与分析 8
2.1 组织RNA提取结果 8
2.2 CTSD基因CDS扩增 9
2.3 海门山羊CTSD基因序列测序 10
2.4 CTSD基因的同源性比对分析 10
2.5 CTSD 基因系统发育树的构建 11
2.6 CTSD基因荧光定量PCR结果分析 11
2.7 CTSD基因在早期胚胎中的表达差异 12
3 讨论 14
3.1 海门山羊CTSD基因的生物信息学分析 14
3.2 CTSD基因在组织和早期胚胎中的表达分析 15
第三章 结论与展望 17
1 结论 17
2 存在的问题 17
3 未来展望 17
参考文献 18
附录 海门山羊CTSD基因测序结果 20
致谢 21
山羊CTSD扩增及其在早期胚胎发育中的影响
摘 要
组织蛋白酶D（Cathepsin D，CTSD）是溶酶体内的一种蛋白酶，促进细胞内大分子蛋白进行水解和降解，并与自噬有关，但是CTSD *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: #351916072# 
在早期胚胎发育过程中的作用仍不清楚。本试验以海门山羊为研究对象，首先通过PCR扩增得到CTSD基因序列，并进行核苷酸的同源性比对，然后构建海门山羊与相关物种的CTSD基因核苷酸序列系统发育树；其次使用qRTPCR对CTSD基因在海门山羊组织的表达量进行分析，获得山羊CTSD的组织表达谱；最后通过生物信息学分析CTSD在山羊、牛、小鼠和人早期胚胎发育过程中的变化，并进行物种之间CTSD基因表达变化趋势的对比分析。结果表明，海门山羊CTSD基因编码区全长1239bp，共编码412个氨基酸，与其它物种相比，海门山羊CTSD编码氨基酸序列与牛的亲缘性最近。qRTPCR结果显示CTSD基因在海门山羊心、肝、脾、肺、肾、卵巢、睾丸7种组织中均有表达，且在肺中的表达量最高。对包括山羊在内的4个物种早期胚胎发育过程中CTSD的表达量分析发现，囊胚期CTSD基因的表达量最高。本试验揭示了CTSD基因在海门山羊的差异表达并初步分析了其生物学功能，为进一步探究CTSD基因的功能与调控机理奠定了基础。

原文链接：http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/609168.html