目录
摘 要 I
ABSTRACT II
绪 论 1
第一章 文献综述 3
1 卵母细胞的发育及成熟 3
2 母体老化影响哺乳动物生殖机能 3
2.1 母体衰老影响线粒体功能及定位 4
2.2 母体衰老影响染色体正常分离 4
2.3 母体衰老增加卵母细胞氧化应激水平 6
2.4 母体衰老影响卵母细胞能量代谢 6
2.5 抗氧化药物改善卵母细胞老化的途径 7
3 NMN的生物学功能及研究进展 7
3.1 补充NMN以提高NAD+水平 7
3.2 NMN逆转卵母细胞老化的可行性 8
第二章 NMN改善老龄小鼠老化卵母细胞质量 9
1 材料与方法 9
1.1 材料 9
1.1.1 抗体和试剂 9
1.1.2 抗体的稀释 9
1.1.3 试剂的配制 9
1.1.4 主要仪器与耗材 10
1.2 方法 10
1.2.1 实验动物 10
1.2.2 小鼠卵母细胞的收集和体外成熟培养 10
1.2.3 NMN给药 10
1.2.4 免疫荧光染色 11
1.2.5 染色体铺片 11
1.2.6 激光共聚焦显微镜的观察 11
1.2.7 统计分析 12
2 结果与分析 12
2.1 补充NMN恢复老龄小鼠卵母细胞减数分裂能力 12
2.2 补充NMN减少老化卵母细胞纺锤体/染色体结构异常发生 13
2.3 补充NMN改善老化卵母细胞动粒微管(KM)连接异常 14
2.4 补充NMN降低老化卵母细胞非整倍体产生 16
3 讨论 16
第三章 结论与展望 20
参考文献 22
致 谢 28
NMN逆转老龄小鼠卵母细胞质量的作用研究
摘 要
高质量卵母细胞是胚胎成功着床及胎儿后续发育的重要基础。随着母体衰 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072@ 
老，雌性动物卵母细胞可能出现线粒体功能及定位紊乱、染色体排列异常、纺锤体组装异常、氧化应激水平升高及能量代谢失调等一系列功能异常，最终导致卵母细胞质量显著下降。传统辅助生殖技术（Assisted reproductive technology, ART）无法解决卵母细胞衰老相关的生殖机能降低问题，且囿于自体/异体胞质移植的伦理和技术限制，因此通过药物治疗或改善因母体衰老导致的生殖障碍成为繁殖领域的切实需求。本研究通过在卵母细胞培养液中添加50、100、200 μM三个不同浓度的烟酰胺单核苷酸(Nicotinamide mononucleotide, NMN)，发现补充外源NMN可以有效改善老龄小鼠卵母细胞第一次减数分裂时期的排极体率、染色体排列、纺锤体组装、动粒微管连接以及非整倍体发生率，其中200 μM的NMN补充水平改善效果最佳，证明了NMN对于逆转卵母细胞衰老的积极作用，为以NMN为代表的营养补充剂改善老化卵母细胞质量的研究作可靠参考，也为采用非侵入性方式提升老龄雌性动物的繁殖潜力提供新路径。但NMN的代谢路径以及给药方式和剂量等安全性问题仍需进一步研究。

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