hdacs家族在小鼠精原干细胞中的表达情况分析【字数:14031】
目录
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摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 文献综述 1
1 精原干细胞概述 1
2 组蛋白修饰及HDACs概述 3
3 HDACs在精原干细胞表达 4
第二章 实验部分 7
1 材料与方法 7
2 实验结果 11
3 讨论分析 13
第三章 结论与展望 15
参考文献 16
致 谢 17
HDACs家族在小鼠精原干细胞中的表达情况分析
摘 要
精原干细胞是雄性动物睾丸中一类能够自我更新和分化的生殖细胞,对雄性动物繁殖力的维持有重要作用。Histone deacetylases (HDACs)编码去乙酰化酶的一类基因,细胞中基因的表达与核小体的乙酰化水平相关,HDACs通过改变核小体中染色质和组蛋白结合方式来降低基因的转录,是一种表观遗传的方式。研究HDACs在精原干细胞中的表达可以探究表观遗传在对生殖细胞的影响,可能对治疗不孕不育和提高动物生产性能具有重要影响。要了解作用机制,首先要检测HDACs基因在精原干细胞中是否沉默,本实验从雄性小鼠的睾丸中分离小鼠的精原干细胞,提取RNA进行RTPCR检测,再制作小鼠睾丸组织的切片,使用免疫组化检查抑制分化相关蛋白HDAC4的表达,在显微镜下可以看到曲细精管基膜处呈褐色,实验结果呈阳性,即说明HDAC4在精原干细胞中表达。
关键字
HDACs; 精原干细胞; 基因的表达; 生殖细胞
STUDY ON THE EXPRESSION OF HDACS FAMILY IN MOUSE SPERMATOGONIAL STEM CELLS
ABSTRACT
Spermatogonial stem cells play an important role in maintaining the fecundity of male animals. Histone deacetylases (HDACs) are a family of genes encoding histone deace *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072*
tylases. Their functions are related to the acetylation level of nucleosomes. HDACs is an epigenetic way to reduce gene transcription by changing the binding mode of chromatin and histone in nucleosome. Studying the expression characteristics of HDACs in spermatogonial stem cells is helpful to understand the effect of epigenetics on germ cells, and may play an important role in the treatment of infertility and improvement of animal production performance. In order to understand the mechanism of action, we first need to detect whether HDACs gene is silenced in spermatogonial stem cells. In this experiment, spermatogonial stem cells of male mice were isolated, and RNA was extracted for RTPCR detection. It was found that HDAC family was expressed in spermatogonial stem cells. The expression of HDAC4 in spermatogonial stem cells was detected by immunohistochemistry. Under the microscope, the oval spermatogonial cells in the basement membrane of seminiferous tubules were brown. The experimental results showed that HDAC4 was expressed in spermatogonial stem cells.
KEY WORDS
HDACs; Spermatogonial Stem Cells; Gene Expression; Germ Cell
第一章 文献综述
1 精原干细胞概述
精原干细胞指位于曲精细管基膜上既能自我更新维持自身适量恒定,又能定向分化产生精母细胞的一类原始精原细胞[1]。随着雄性动物的出生,原始生殖细胞转化为生殖母细胞,迁移到生精小管基膜部,并分化为精原干细胞。精子的在其发生过程中,由精原干细胞在相关因子及信号的调控下分化增殖产生大量精子。在生物繁殖的过程中,精原干细胞起到传递雄配子的关键作用,是在精子发生过程中一类极为重要的最幼稚的前体细胞[2]。也是雄性哺乳动物体内唯一能够将其自身遗传物质传递给后代的细胞类群。
精原干细胞数量很少,据估测,在成年小鼠睾丸中约有 108 个细胞,其中约有 2×104 个是精原干细胞,仅占睾丸所有生精上皮细胞总数的0.02%~0.03%[3]。其余大部分生殖细胞为高度特化时期的精子细胞、正在进行减数分裂的精母细胞和有丝分裂的精原细胞。所以,精原干细胞的数量少也是其显著特征之一。
原文链接:http://www.jxszl.com/yxlw/dwyx/609120.html