炎症性肠病(inflammatory bowel disease，IBD)是一种具有复发性与非特异性的，慢性炎症性肠道疾病，主要包含有溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)和克罗恩病(Crohn’s disease，CD)。革兰氏阴性菌大肠杆菌 Nissle 1917 (Escherichia coli Nissle 1917, EcN)是一种典型的大肠杆菌菌株，具有广泛的免疫调节作用，可维持肠道内环境稳定，调节免疫系统，对机体正常功能的发挥具有重要作用。本实验通过对小鼠进行Nissle 1917和野生型大肠杆菌的不同灌胃处理，观察对比Nissle 1917对小鼠各项生理指标的影响作用。发现Nissle 1917对肠道的稳定有一定维持作用，在本实验条件下对正常小鼠没有明显增益或负面影响，可进一步实验观察其对肠炎小鼠的影响。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言1
1 材料与方法2
实验材料 2
1.1.1 实验动物2
1.1.2 大肠杆菌2
1.1.3 主要试剂2
1.1.4 试剂的配制2
1.1.5 培养基的配制3
1.1.6 主要仪器3
1.2 实验方法3
1.2.1 实验设计3
1.2.2 灌胃3
1.2.3 粪便检测4
1.2.4 HE染色4
1.2.5 照片采集4
1.2.6 观察指标4
2 结果与分析5
2.1 小鼠体重变化5
2.2 小鼠结肠长度6
2.3 HE染色结果7
3 讨论 9
3.1 体重变化9
3.2 结肠长度变化9
3.3 肠道组织切片10
致谢10
参考文献10
益生菌Nissle对小鼠炎症性肠病的影响
引言
炎症性肠病(Inflammatory Bowel Disease，IBD)是一种具有复发性与非特异性的，慢性炎症 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ￥351916072￥ 
性肠道疾病，主要包含有溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis，UC)和克罗恩病(Crohn’s Disease，CD)，这两种慢性炎症性疾病都具有典型的成年早期发病时间和以缓解和复发为特征的终生病程，虽然IBD的发病机制还不是很清楚，但发现其病因学机制与包括免疫异常、遗传影响和环境因素的相互作用有关[1]。肠道微生物含量丰富，与体内多种生理活动具有广泛联系，对人类的健康至关重要。正常情况下，这些细菌并不引起炎症反应，但某些情况下，这些细菌可引起免疫系统过度活化从而导致严重的炎症反应。目前发现IBD发病与肠道微生物相关。
革兰氏阴性菌大肠杆菌 Nissle 1917 (Escherichia coli Nissle 1917, EcN)是一种典型的大肠杆菌菌株。它是大肠杆菌家族的非致病性成员，因为它不携带致病性粘附因子，不产生任何肠毒素或细胞毒素，不具有侵袭性，不具有泌尿致病性，并被血清中的非特异性防御因子迅速杀灭[2]。此外，EcN还具有与其他致病性大肠杆菌和非致病性大肠杆菌不同的一些特殊特性，并被认为是其益生菌活性的重要来源。EcN的另一个特异特性是其外细胞膜上的一种特殊脂多糖(LPS)，这是EcN具有免疫调节特性而不具有免疫毒性作用的原因。其免疫调节特性主要集中在抗炎活性方面，对溃疡性结肠炎缓解维持的临床疗效具有重要意义。同样重要的是EcN和肠上皮细胞之间的细菌上皮相互作用，导致上皮屏障的增强和“肠漏”现象的治疗。EcN恢复紊乱的肠道屏障被认为是由于刺激上皮防御素的产生以及对肠细胞紧密连接的“密封作用”。EcN还被证明可以诱导动物模型和人类新生儿肠道免疫系统的发育。此外，已发现EcN代谢产物，可能是醋酸，促进结肠运动，这可能有助于治疗慢性便秘患者。随机对照临床试验(RCTs)显示，EcN在相当多的适应症，如溃疡性结肠炎、慢性便秘、急性和慢性腹泻方面具有治疗效果[35]。
EcN具有广泛的免疫调节作用，但过度的免疫反应会引起肠炎。有早期研究发现，EcN的定殖会导致宿主细胞因子谱发生变化，同时增加免疫球蛋白A的分泌，促进活化淋巴细胞或巨噬细胞，调节CD4+的克隆性增殖，刺激肠道上皮细胞合成抗微生物肽。近期也有研究表明，EcN可活化γδT 细胞，刺激CXCL8 和白介素6 ( IL 6 ) 的释放，同时也抑制 TNFα 的释放。在活化γδT 细胞后，EcN 还可诱导活化的 γδT 细胞凋亡，这说明 EcN可以调节自适应和固有免疫反应间的平衡，在 T 细胞相互影响中，有着非常重要的作用。EcN 还能通过阻断TNFα的合成来诱导IL 8的分泌，通过非依赖NFκB 机制在上皮细胞中直接表现出抗炎活性[67]。
当肠道内环境发生改变时，可能会引起肠道菌群结构失衡，从而影响到肠道的正常功能。当肠道菌群出现紊乱时，肠道微生态系统也会受到破坏，甚至导致肠道的感染。所以，研究炎症性肠病患者肠道菌群的结构变化以及这种变化与炎性指标间的关系，对研究炎症性肠炎的发生与他的后续治疗有着十分重要的意义。
肠粘膜上皮细胞间的主要连接方式为紧密连接。这种连接保障肠粘膜屏障机械结构完整，有助于其发挥正常作用。EcN 所释放的可溶性产物中除OMVs 和 tcpC 之外，还有其他有效成分可以调节紧密连接蛋白 的表达，对这些可溶性产物的进一步分离提纯，可能是揭示EcN 有效作用的研究方向之一[8]。某些 miRNA 被证明与肠道上皮的稳态和完整性密切相关，EcN 是否可以通过影响这些 miRNA 的表达来保护肠道上皮屏障，也值得进一步研究。EcN 作为一种益生菌，且应用广泛，在各种胃肠功能紊乱和免疫性疾病中，也有不错的效果，不仅安全而且耐受性良好，是一种有着巨大前景的大肠杆菌。 EcN可以维持肠道内环境稳定，同时调节免疫功能，对机体正常机能的发挥具有十分重要的作用。随着研究的不断深入和应用的广泛开发，EcN 将对维持人类的健康提供更加重要的作用[9]。
1 材料与方法
1．1 实验材料

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