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茶树csstop1的克隆及生物信息学分析【字数:15269】

2024-11-24 14:15编辑: www.jxszl.com景先生毕设

目录
摘 要 Ⅰ
ABSTRACT Ⅱ
第一章 文献综述 1
1 铝对茶树生长发育的影响 1
2 植物的铝毒害 1
3 植物抵抗铝毒的机制 2
4 对铝转运相关C2H2锌指转录因子CsSTOP1的研究 5
第二章 茶树CsSTOP1的生物信息学分析 7
1 CsSTOP1氨基酸理化性质的分析 7
2 CsSTOP1蛋白信号肽预测 8
3 CsSTOP1蛋白的亲水性和疏水性分析 9
4 CsSTOP1蛋白的二级结构预测 10
5 CsSTOP1蛋白的跨膜结构预测 11
第三章 茶树CsSTOP1的克隆 12
1 试验材料 12
2 试验方法 13
3 结果与分析 19
4 讨论 22
第四章 结论与展望 24
参考文献 26
致 谢 29
茶树CsSTOP1的克隆及生物信息学分析
摘 要
茶树适宜生长在酸性土壤上,又由于在酸性土壤中植物受到铝离子的毒害作用,植物自身会做出响应,形成抵抗铝毒的机制。为研究C2H2锌指型转录因子STOP1(sensitive to proton rhizotoxicity 1)在茶树中的生物学功能以及铝胁迫下发挥的作用机制。本研究以茶树品种“龙井长叶”叶片以及“白叶一号”叶片作为研究材料,提取总RNA后采用RTPCR技术反转录成cDNA,在采取PCR扩增技术得到茶树转录因子STOP1基因编码序列。通过查找TPIA数据库,从茶树‘舒茶早’基因组中找到2组编码转录因子STOP1的基因,命名为CsSTOP11、CsSTOP12。对目的基因进行生物信息学分析,其中CsSTOP11 cDNA全长为1584bp,编码527个氨基酸,分子量为58829.64 Da,等电点为5.64;另外,CsSTOP12 cDNA全长为1431bp,编码476个氨基酸,分子量为53148.71 Da,等电点为6.13。亚细胞定位显示,二者皆定位于细胞核中。利用黏性末端连接技术构建转录因子CsSTOP1的克隆载体pEAS *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: #351916072
YT1 Simple Cloning Vector,将目的基因PCR产物插入pEASYT1 Simple Cloning Vector载体中,将构建的重组质粒转化进入DH5α大肠杆菌化学感受态细胞。最终测序结果显示,转录因子CsSTOP11、CsSTOP12克隆成功。该研究为进一步探明C2H2锌指型转录因子STOP1的生物学功能提供了基础材料。

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