目录
摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 文献综述 1
1 植物衰老机理 1
1.1自由基理论 1
1.2 细胞程序性死亡（PCD）理论 1
2 延缓植物衰老的重要性 2
3 植物衰老相关基因的研究进展 2
4 WRKY相关蛋白的研究进展 3
5 研究目的与意义 4
第二章 材料与方法 1
1试验材料及处理 1
2 主要仪器 1
3 DNA的提取 1
4总RNA的提取、检测以及cDNA的合成 1
4.1总RNA的提取 1
4.2 RNA的检测 1
4.3 cDNA第一链的合成 1
5 Tnt1突变体的鉴定 2
6荧光定量PCR 3
7叶绿素含量的测定 4
第三章 结果与分析 4
1MtWRP1突变体株分析及鉴定结果 5
3 MtWRP1的功能初步分析 5
3.1衰老表型对比 6
3.2 提取植株叶绿素 6
4衰老相关基因的表达特性分析 7
4.1植物组织总RNA的提取与检测 7
4.2 SAG102的表达情况 7
4.3PPHF基因的表达情况 8
4.4 SGR基因的表达情况 8
第四章 讨论 9
1 MtWRP1在叶绿素降解中的作用 10
2 MtWRP1在衰老相关基因表达过程中的作用 10
第五章 结论与展望 11
1结论 11
2展望 12
参考文献 14
蒺藜苜蓿MtWRP1在植物衰老中的功能分析
摘 要
WRKY相关蛋白（WRKY Related Protein，WRP）是豆科植物特有的一类蛋白质。在长期演化过程中，WRP产生了与WRKY相似但又有所区别的序列结构，因此具有了类似于WRKY但又独特的生物学功能。目前，对WRP的功能认识还非常有限。本实验以MtWRP1过 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: ^351916072* 
表达转基因蒺藜苜蓿，Tnt1反转录转座子蒺藜苜蓿突变体，以及野生型蒺藜苜蓿R108为材料，对MtWRP1在植物衰老过程中的作用进行分析。主要的研究结果如下：
（1）首先对突变体体株系NF12769、NF13984进行了分子鉴定，发现两个株系中Tnt1的插入位点都位于MtWRP1的外显子区，会导致MtWRP1基因的失活。因此，NF12769、NF13984株系均为MtWRP1基因缺失突变体。收获纯合突变体种子，用于功能分析。
（2）相较于野生型植株，MtWRP1突变体蒺藜苜蓿叶片黄化明显，茎叶脱落多，整体萎蔫，衰老程度明显。MtWRP1突变体蒺藜苜蓿的叶绿素含量均下调。MtWRP1过表达蒺藜苜蓿的表型性状相较于野生型差异不显著。
（3）以野生型株系为对照，黑暗处理后MtWRP1突变体蒺藜苜蓿NF12769、NF13984的衰老相关基因的表达量显著上升。其中突变体蒺藜苜蓿NF12769的衰老相关基因SAG102、PPHF、SGR的表达量为野生型的22.09倍、28.51倍、53.76倍，突变体蒺藜苜蓿NF13984的衰老相关基因SAG102、PPHF、SGR的表达量为野生型的21.47倍、49.48倍、68.75倍。
由此我们推测，MtWRP1可能参与植株对衰老进程的调控，与其他衰老相关基因同作用于植株的衰老过程。MtWRP1的缺失会加速叶片黄化衰老。

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