目录
摘要 I
ABSTRACT II
目录
第一章 绪论 2
1.1背景 2
1.2多年生黑麦草耐热性进展 3
1.2.1高温对植物的伤害 3
1.3高温下植物生理变化 3
1.3.1高温下植物激素变化 3
1.3.2细胞膜变化 4
1.3.3叶片衰老和光合特性变化 4
1.3.4高温下酶活性变化 5
1.4应用研究 5
1.5研究目的，内容，技术路线 6
1.5.1研究目的 6
1.5.2研究内容 6
1.5.3研究指标 6
1.5.4技术路线 6
第二章 正文 5
2.1植物材料和生长条件 5
2.2生理生化指标测量 6
2.2.1叶绿素含量测定 6
2.2.2电解液泄漏（EL）的测量 6
2.2.3丙二醛（MDA）含量的测定 6
2.2.4超氧化物歧化酶（SOD）活性的测定 7
2.2.5过氧化氢酶（CAT）活性的测定 7
2.2.6过氧化物酶（POD）活性的测定 7
2.2.7抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性的测定 7
2.2.8叶片中O2含量的测定 8
2.2.9叶片中H2O2含量的测定 8
2.3实时荧光定量PCR检测基因表达 8
2.4统计分析 8
2.5实验结果 8
2.5.1 LpNOL基因敲除对多年生黑麦草热诱导叶片衰老的抑制作用 8
2.5.2 LpNOL敲除对活性氧（ROS）产生、抗氧化酶活性和基因表达的影响 10
2.5.3 LpNOL敲除对Chl降解和合成基因表达水平的影响 12
2.6讨论 13
第三章 结论与展望 14
参考文献 15
致 谢 18
LpNOL基因调控多年生黑麦草耐热性研究
摘要
多年生黑麦草（Lolium *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072@ 
perenne）是冷季型禾本科植物，夏季高温是多年生黑麦草的重要逆境胁迫因子。高温下多年生黑麦草下可以激活体内抗氧化防御系统，提高多种氧化酶活性，从而有效降低植物体内产生的活性氧含量，提高细胞膜的稳定性，降低高温对植株的危害。叶绿体是产生活性氧的主要细胞器。前期研究发现，定位于叶绿体的LpNOL基因是控制叶绿素b还原酶编码基因。本研究旨在分析LpNOL是否参与调控热胁迫引起的活性氧积累，以及抑制其表达是否能延迟热胁迫导致的叶片早衰。结果发现LpNOL表达水平受高温诱导上调表达；以RNAi干扰LpNOL的转基因株系（NOLi）为实验材料，在高温（35/30℃ 昼/夜）和最适温度（25/20℃）下培养，发现高温胁迫下，与野生型相比，转基因黑麦草的叶片叶绿素降解速度慢、相对电导率降低，过氧化物含量降低，过氧化氢清除酶活性较高。在热胁迫解除后，两种NOLi株系恢复均优于野生型。据此得出，抑制LpNOL基因的转录可以有效地延缓高温诱导叶片中的活性氧积累和叶片衰老。

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