国内多环芳烃（PAHs）污染日趋严重，该污染已成为近几年环境问题的热点难题。本文以菲作为PAHs代表性污染物，以黑麦草作为供试植株，研究PAHs污染条件下，植物体内可培养内生细菌的种群数量变化及其对菲的降解效能。实验结果表明，当菲污染浓度为0.1 mg·L-1时，黑麦草体内可培养内生细菌总量(6.6 log CFU·g-1 FW)小于对照组(CK)(7.3 log CFU·g-1 FW)；当菲污染浓度为0.8 mg·L-1时，黑麦草体内可培养内生细菌总量(7.9 log CFU·g-1 FW)大于对照组(CK)。另外，黑麦草根中可培养内生细菌的总数明显大于茎叶中可培养内生细菌的总数，根和茎叶中菲的浓度均随着菲污染浓度的增加而增大。同时，部分可培养植物内生细菌可降解培养基中菲，其中有些可培养内生细菌能够降解培养基中90%以上的菲。
目录
摘要 1
关键词 1
Abstract 1
Key words 1
引言 1
1 材料与方法 2
1.1 实验材料 2
1.1.1 化学试剂与供试植株 2
1.1.2 营养液与培养基 2
1.2 实验方法 2
1.2.1 黑麦草水培试验 2
1.2.2 黑麦草生物量测定 3
1.2.3 植物样品中PAHs的提取和测定 3
1.2.4 植物体内可培养内生细菌的分离纯化 3
1.2.5 植物内生细菌的菌种鉴定 3
1.2.6 植物内生细菌对菲的降解效能测定 3
1.3 数据处理 4
2 结果与分析 4
2.1 植物样品中菲含量 4
2.2 植物体内可培养内生细菌的种群结构 4
2.2.1 黑麦草体内可培养内生细菌的多样性及菌种鉴定 4
2.2.2 不同处理条件下，植物根、茎叶中可培养内生细菌的种群数量 5
2.3 植物体内可培养内生细菌对菲的降解效能 5
3 结论 6
致谢 7
参考文献 7
黑麦草体内可培养内生细菌的种群数量对菲污染的响应
 *景先生毕设|www.jxszl.com +Q: ^351916072# 
引言
引言
PAHs是环境中普遍存在的一类持久性有机污染物，具有致癌、致畸、致突变的特点。人类生产活动产生的大量PAHs进入土壤后，容易被植物吸收积累，并通过食物链的传递，进而威胁到动物和人类健康[13]。
PAHs进入土壤被植物吸收后，能够改变植物内生细菌的种群数量和群落结构[24]。研究表明，低浓度的菲能够减低植物体内可培养内生细菌的总数，而高浓度的菲能够增加植物体内可培养内生细菌总数。同时，部分植物吸收PAHs后，可在体内代谢PAHs，而植物体内内生细菌在这一过程中起到重要作用[4]。植物内生细菌能够长久定殖在植物健康组织间隙或细胞内，并与宿主植物建立和谐共生关系，它们可通过产生生长素或酶类等次生代谢产物，促进植物生长，提高植物的抗逆性，某些特殊的植物内生细菌具有降解植物体内有机污染物的能力[57]。
本文主要以菲作为PAHs代表性污染物，同时添加少许芘，以黑麦草作为供试植株，研究单一菲污染及菲、芘混合污染条件下，植物体内可培养内生细菌的种群数量变化及其对菲的降解效能。该研究阐明植物内生细菌对PAHs污染的响应，并为进一步从污染场地的健康植株体内筛选出具有降解特性的功能内生细菌提供依据，为更好地解决PAHs污染奠定基石。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 化学试剂与供试植株
化学试剂：菲(Phenanthrene，购自德国Fluka公司，纯度≥98%)，分子量(Mw)为178.23 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为1.18 mgL–1，辛醇水分配系数(log Kow)为4.57。芘(Pyrene，购自德国Fluka公司，纯度＞98%)，分子量(Mw)为202.26 gmol–1，25℃纯水中溶解度(Sw)为0.12 mgL–1，辛醇水分配系数(log Kow)为5.18[8]。甲醇为色谱醇，其它试剂为分析纯。
供试植物：多年生黑麦草(Lolium multiflorum Lam)。
1.1.2 营养液与培养基
霍格兰营养液(Hoagland nutrient solution)：Ca(NO3)24H2O 945 mgL–1，KNO3 506 mgL–1，MgSO4 493 mgL–1，KH2PO4 136 mgL–1，NH4NO3 80 mgL–1，pH 5.5；铁盐溶液(2.5 mL)：FeSO47H2O 2.78 g，EDTANa2 3.73 g，蒸馏水500 mL；
微量元素溶液(5 mL)：MnSO4 22.3 mgL–1，ZnSO4 8.6 mgL–1，H3BO3 6.2 mgL–1，KI 0.83 mgL–1，Na2MoO4 0.25 mgL–1，CuSO4 0.025 mgL–1，CoCl2 0.025 mgL–1，pH 6.0。
LB培养基：蛋白胨10.0 gL–1，酵母粉5.0 gL–1，NaCl 10.0 gL–1，pH 7.0。固体培养基中加入2.0%琼脂。
无机盐培养基(MSM)： MgSO47H2O 0.20 gL–1，K2HPO43H2O 1.91 gL–1，(NH4)2SO4 1.50 gL–1，KH2PO4 0.50 gL–1；
微量元素溶液(2 mL)：MnCl24H2O 0.425 mgL–1，CoCl26H2O 0.1 mgL–1，Na2MoO42H2O 0.01 mgL–1，ZnCl2 0.05 mgL–1，CuSO45H2O 0.015 mgL–1， Na2SeO42H2O 0.01 mgL–1，NiCl26H2O 0.01 mgL–1，pH 7.0。
PAHs降解培养基(PMM)：取一定量的菲(1 mgmL1)丙酮母液过0.22 μm滤膜除菌，置于50 mL灭菌三角瓶中，待丙酮挥发完，加入已灭菌的MSM培养液，配置成PMM培养基。除非说明，菲的终浓度分别为100 mgL1。

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