根茎类蔬菜中抗生素抗性细菌的数量和优势种群【字数:13672】
目录
摘 要 I
ABSTRACT II
第一章 文献综述 1
1 抗生素概述 1
2 环境中的抗生素/ARB/ARGS的来源 1
3 抗生素/ARB/ARGS在土壤—植物系统中的迁移转化 2
3.1 抗生素/ARB/ARGs在土壤—植物系统中的环境行为 2
3.2 抗生素/ARB/ARGs在土壤—植物系统中的生态环境风险 3
4 研究目的与意义 4
第二章 根茎类蔬菜中抗生素抗性细菌的数量和优势种群 5
1 材料与方法 5
1.1 实验材料 5
1.2 实验方法 5
1.3 数据处理 7
2 结果与分析 7
2.1 根茎类蔬菜中抗性细菌的数量 7
2.2 根茎类蔬菜中抗性细菌的分离和鉴定 8
2.3 根茎类蔬菜中抗性细菌的优势种群 14
2.4 根茎类蔬菜中优势抗性细菌的抗性谱 16
3 讨论 23
第三章 结论与展望 25
1 结论 25
2 展望 25
参考文献 26
附 录 DNA提取试剂盒操作 28
致 谢 29
根茎类蔬菜中抗生素抗性细菌的数量和优势种群
摘 要
近年来,农田土壤—蔬菜体系中未完全降解的多种抗生素以及由其导致的抗性致病细菌已对人体健康和生态环境造成严峻的威胁。基于此,本项目设置初始浓度2 µg/ mL的强力霉素、多粘菌素、罗红霉素、卡那霉素、氯霉素和氨苄青霉素六种抗生素为筛选条件,采用梯度稀释涂布平板计数法,研究了马铃薯和人们日常生食的小萝卜两种根茎类蔬菜中各种抗生素抗性细菌的数量;挑选其中的优势种群为检测对象,进一步设置初始浓度为0、2、4、8、16、32、64、128 µg/ mL的六种抗生素筛选条件,检测各优势菌株的抗性谱;进一步提取各优势菌株的总DNA后,通过PCR技术体外扩增各菌株的16S rRNA基因序列并对其进行测序分析,获得的序列经同源性比对分析确定各菌株的进化地位; *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072@
在此基础上,系统地分析了这两种根茎类蔬菜真根、果皮和果肉中抗性细菌的数量、优势种群、种群多样性以及分布特征。结果表明,小萝卜真根组织中抗性细菌数量为6.2×105~3.3×107 CFU/g,果皮和果肉组织的抗性细菌数量为1.2×105~ 4.7×106 CFU/g,其中多粘菌素抗性细菌数量最多,卡那霉素次之;马铃薯果皮组织中抗性细菌数量为1.4×104~4.4×105 CFU/g,果肉组织的抗性细菌数量为2.2×102 ~2.4×103 CFU/g,其中氯霉素抗性细菌数量最多,多粘菌素次之。大部分抗性细菌在相应的抗生素浓度达到128 µg/mL时无法生长,但有个别菌株仍可生长,其抗性机制尚需进一步研究。总体来看,小萝卜和马铃薯中的各类抗性细菌优势种群皆为bacillus sp.,占比约为40%~85%;而其他细菌种群占比相对较少。该研究初步明确了根茎类蔬菜中的抗性细菌数量、优势种群以及各优势菌株的抗性谱,研究结果可为评估根茎类蔬菜中的抗性细菌现状提供依据。
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